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本報告中不同泳道中TAQ酶的來源公司:

Lane1:? 國外品牌? Lane2:? 國內品牌 Lane3:? KeyGen I Lane4:? KeyGen II

M: DNA Marker, DL2000

本報告中對擴增的長片段：

長片段模板DNA為pET28a-MHC I Heavy Chain ；短片段模板DNA為pET28a-β₂microglobulin ；

所用引物濃度為10uM ；dNTP濃度為10mM ；

通用反應體系為：

H₂O???????? ?*

10×Buffer? ???????2.5

MgCl₂??????? ??*

dNTP????????? 0.7

up-stream primer???? ????0.7

down-stream primer? ???????0.7

plate DNA????????? 1

Taq polymerase???????? ?*

Total volume????????? 25 uL

注：1）本體系以25 uL反應體積為例，50 uL 反應體積各反應物加倍。

2）* 表示所加量根據不同反應作相應的調整。

1.??? 不同酶量時四種TAQ酶擴增長片段效率的比較

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Fig.1 不同酶量時四種TAQ酶擴增長片段效率的比較

結論： 對長片段：高酶濃度時擴增效率: 酶1 = 酶3 = 酶4 > 酶2 ;

??? ?????????????低酶濃度時擴增效率: 酶1 > 酶3 = 酶4 > 酶2 ;

??? ?????????????對四種酶,高酶濃度的擴增效率優于低酶濃度.

2.??? 不同反應體積時四種TAQ酶擴增長片段效率的比較

Fig.2 不同反應體積時四種TAQ酶擴增長片段效率的比較

結論： 對長片段：25ul 和50ul反應體系時擴增效率: 酶4 > 酶3 = 酶1 > 酶2 ;?

?? ??????????????對四種酶, 25ul反應體系擴增效率優于50ul反應體系.

3.??? 不同模板拷貝時四種TAQ酶擴增長片段效率的比較

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Fig.３ 不同模板拷貝時四種TAQ酶擴增長片段效率的比較

結論：對長片段：高模板濃度時擴增效率: 酶4 = 酶3 = 酶1 > 酶2 ;

??? ????????????低模板濃度時擴增效率: 酶4 > 酶3 > 酶1 > 酶2 ;

??? ????????????對四種酶,高模板濃度的擴增效率優于低模板濃度.

4.??? 不同酶量時四種TAQ酶擴增短片段效率的比較

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Fig.４ 不同酶量時四種TAQ酶擴增短片段效率的比較

結論：對短片段：高酶濃度時擴增效率: 酶1 = 酶3 > 酶4 = 酶2 ;

??? ????????????低酶濃度時擴增效率: 酶4 > 酶3 = 酶2 = 酶1 ;

??? ????????????對四種酶,高酶濃度的擴增效率優于低酶濃度.

5.??? 不同反應體積時四種TAQ酶擴增短片段效率的比較

Fig.５ 不同反應體積時四種TAQ酶擴增短片段效率的比較

結論：對短片段：25ul 和50ul反應體系時擴增效率: 酶1 = 酶3 = 酶4 > 酶2 ;?

?? ?????????對四種酶, 25ul反應體系擴增效率相似于50ul反應體系.

6.??? 不同模板拷貝時四種TAQ酶擴增短片段效率的比較

Fig.６ 不同模板拷貝時四種TAQ酶擴增短片段效率的比較

結論：對短片段：高模板濃度時擴增效率: 酶3 > 酶4 = 酶1 = 酶2 ;

??? ????????????低模板濃度時擴增效率: 酶4 > 酶1 > 酶3 > 酶2 ;

??? ????????????對四種酶,高模板濃度的擴增效率優于低模板濃度.

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