威斯騰醫學診斷：探索CRISPR/CAS9技術在產業化過程中的“未知之美”

CRISPR/CAS9基因編輯技術是近年生物技術領域的明星。關注該技術的人都知道，CRISPR/Cas9是一種在大多數細菌和古細菌中發現的一種天然免疫系統，可用來對抗入侵的病毒及外源DNA。它從問世之初就一直備受矚目。2012年CRISPR/Cas9機理被揭示，2013年CRISPR/Cas9系統可以對人體基因進行編輯，2014年數百篇論文充斥科研界，2015年的 “定制胚胎”，2016年應用到人體的試驗，短短四年多時間，CRISPR/Cas9以其廉價、快速、簡易的特點在生物醫學研究中引起一場變革。

從技術優化、動植物改良到疾病治療，以CRISPR基因編輯技術為支撐的研究和應用越來越多。無論是科研人員還是醫藥企業都紛紛對該技術表現出極大的熱情和推崇，重慶威斯騰生物醫藥科技有限責任公司醫學診斷事業部（以下簡稱“威斯騰醫學診斷”）也是其中一員。創新一直以來都是威斯騰醫學診斷強調和執行的理念。公司把創新貫穿到每個細節當中，在新藥的開發上以及公司的運營上，都始終保持著最高漲的創新意識。

威斯騰醫學診斷CRISPR/CAS9團隊組建與2013年，團隊負責人申友鋒（高級工程師）曾在版納豬近交系重點實驗室工作，致力于基因靶向操作技術研究，參與國家重大科研項目“973”項目，先后利用Talen技術成功敲除豬p53基因同時過表達H-ras+c-myc基因，成功構建出豬的腫瘤模型。在實驗室項目組建立了CRISPR/CAS9技術體系，成功敲除豬GGTA1基因、H19基因、leptin基因等。13年加入威斯騰生物，組建成立了CAS9研發團隊，作為國內首批運用CRISPR/Cas9技術進行基因藥物開發的企業，主要致力于CRISPR/Cas9技術基礎研究和病毒性疾病治療中的應用。目前，該團隊已經在CRISPR/Cas9靶向基因修飾藥物開發平臺搭建、基因藥物開發等方面已經取得了可喜的進展。

據了解，威斯騰醫學診斷Cas9團隊目前的工作重心主要包括：CRISPR/Cas9載體輔助轉基因體系的構建和抗病毒基因藥物研發兩個方面。除了利用Talen、 CRISPR/Cas9技術構建細胞、動物模型，研究團隊一直在致力于提高轉基因效率。通過改造CRISPR/Cas9系統，提高轉基因小鼠、細胞的效率。同時，研究團隊還在致力于抗病毒基因藥物的研發，針對病毒基因組設計CRISPR/Cas9靶位點，破壞病毒基因組完整，清除病毒。目前公司針對乙肝病毒開展CRISPR/Cas9抗病毒基因藥物的研發。如果成功，將會革新傳統的乙肝治療手段和效率。

CRISPR/Cas9的運用如火如荼之，但是圍繞其展開的**之爭、安全顧慮和倫理擔憂，也讓時下研究人員不得不放緩腳步謹慎思考和應用。更何況，CRISPR技術還處于不斷完善的不成熟狀態，所以對其應用勢必存在局限和問題?；仡?/span>Cas9團隊對CRISPR技術產業化應用過程中出現的問題，無外乎安全和效率兩大問題：

1. CRISPR體系不成熟、脫靶效率高：

CRISPR存在重大的局限性就是會出現脫靶效應（off-target effect）。CRISPR大神張鋒的研究小組通過創建了3個新版本的Cas9酶大大降低了CRISPR/Cas9系統的脫靶效應，降低了該技術應用的錯誤率。

威斯騰醫學診斷Cas9團隊的應對策略是通過大量篩選基因靶位點，提高準確率和切割效率。威斯騰醫學診斷申友鋒表示，一個技術，無論成熟與否，將其與實驗室已有體系融合利用都需要反復摸索。回顧團隊的研發之路，他笑言，加班加點、海量篩選方是增加成功概率的不變“捷徑”。

2. 改造適合運載CRISPR的病毒載體：

目前，對CRISPR病毒載體的優化工作仍然是團隊的工作重心之一。此外，除了篩選病毒載體之外，威斯騰醫學診斷還在考慮應用納米載體。

CRISPR基因編輯技術是一把雙刃劍，它可以作為科學家探索未知、企業創新研發的工具之一，但是需要應用之人懷著負責嚴謹的科研態度加以運用。他強調，除了脫靶、切割效率等問題之外，還應考慮到因為CRISPR技術建立在人類基因組數據分析之上，而我們現在對人類基因組認識還不完全，所以對其使用更應該慎重再慎重。此外，基因編輯人體基因還涉及倫理、公平問題。

事實上，越來越多的公司看到了CRISPR將帶來的巨大商業價值。2015年年初，致力于CRISPR應用于治療領域的Intellia Therapeutics獲諾華投資，共同加速發展CRISPR/Cas9技術在CAR-T細胞治療和造血干細胞中的應用。同時，張峰創辦的Editas Medicine宣布將于2017年使用CRISPR進行臨床試驗來治療一種罕見失明癥狀。2016年7月6日四川大學華西醫院通過了長達半年的倫理審批，并在10月份開展了全球首個將CRISPR-Cas9基因編輯技術應用到人體的試驗。10月，福泰制藥（Vertex）宣布于CRISPR Therapeutics藥物研發公司合作CRISPR藥物。緊接著，12月21日，拜耳與CRISPR Therapeutics宣布成立一家專注于開發和商業化血液疾病、失明和先天性心臟病新療法的合資企業。

與國外的大動作不同，國內基于CRISPR技術的商業運作目前還處于比較平靜的態勢。威斯騰醫學診斷作為國內進軍CRISPR/Cas9技術藥物研發和疾病治療的第一梯隊成員，具備熟練運用CRISPR技術在人、小鼠、豬等多物種的多個基因進行基因敲除、基因敲入和基因修復等基因編輯工作，并在此基礎之上進行CRISPR敲除基因靶點基因藥物的研發工作。未來， Cas9研發團隊將繼續疾病治療的創新項目研究，盡早實現CRISPR技術藥物研發、疾病治療的預期價值。

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