我們可供給您的昆蟲宿主細胞系:
細胞 | 來源 | 用途 |
Sf9 | Sf9細胞系分離自IPLBSF21-AE | 適于轉染、純化、生產高滴度病毒、鋪板以及表達重組蛋白 |
Sf21 | Sf21細胞衍生于IPLBSF-21細胞系 | 轉染、純化、生產高滴度病毒、鋪板以及表達重組蛋白。Sf21細胞在一些結構表達方面優于Sf9細胞。 |
Hi5 | Hi5細胞系源于白菜尺蠖卵巢細胞,粉紋夜蛾細胞 | 適用于重組病毒顆粒表達,也常用于轉染和空斑純化,且Hi5細胞系更適合來表達分泌型重組蛋白 |
S2 | S2?是一種果蠅晚期胚胎細胞。其中多為雌性四倍體細胞,也有雙倍體細胞 | 比較適合病毒結構蛋白等重組表達 |
主要服務步驟:
客戶可提供具體的服務要求,或者由卡梅德生物全權制備重組蛋白
步驟 | 服務內容 | 時間 |
亞克隆 | *密碼子優化,基因合成(無基因表達);客戶提供質粒:擴增并抽提含有目標基因的載體質粒 *拼接序列驗證:測序 *交付:正確構建的重組表達質粒及測序原始報告 | 2周 |
病毒擴大化培養 | *重組bacmid DNA擴大化培養,并轉染昆蟲細胞制備P1和P2病毒stock * P2病毒滴度測定(滴度108-109),并驗證小量蛋白表達 *P3病毒制備(可選,最多可制備3L重組桿狀病毒) 交付:5-10 ml, >107?pfu/ml?病毒及實驗報告 | 3–4周 |
表達優化及測試 | *P3病毒貯液轉染昆蟲細胞 -?不同的昆蟲細胞系 -?不同的表達時間 -?不同的感染復數(MOI) *SDS-PAGE及WB分析 交付:圖片,實驗報告 | 1-2周 |
大規模重組蛋白表達及純化 | * 1L (默認),5L,10L,30L,80L,130L和250L任選 -?通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。 *SDS-PAGE和WB驗證蛋白表達 交付:重組蛋白1~5mg及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。 | 1–2周 |
我們的服務優勢:
*密碼子優化:包含稀有密碼子分析,蛋白親水性分析和跨膜結構域的預測分析
*多種融合標簽載體和宿主,以保證高可溶蛋白表達和高蛋白活性
*多種規模蛋白發酵模式:小規模(500ml,2.5L,10L和30L)、大規模(80L,130L,250L和500L發酵罐)
*短時間內制備高純度毫克級,克級重組蛋白
*低內毒素:LAL檢測法<0.1EU/ug
*完整的GMP文件支撐體系,保證所有材料、試劑和制備信息可追溯
