
Solarbio作為一家全國先進(jìn)的小分子化合物供應(yīng)商,其產(chǎn)品的安全性和有效性已經(jīng)被大量文獻(xiàn)證實(shí),僅2021年SCI發(fā)表文獻(xiàn)中,使用索萊寶產(chǎn)品的文獻(xiàn)近10000篇,在Nature、Cell等頂級(jí)刊物上的文章也層出不窮。同時(shí),我們提供詳盡的化學(xué)信息和生物學(xué)信息,并提供說明書、MSDS、質(zhì)量報(bào)告等文件,旨在打造令客戶滿意的放心平臺(tái)。
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Solarbio小分子化合物系列產(chǎn)品已推出了數(shù)年,期間不少產(chǎn)品被用戶頻繁的訂購,并發(fā)表了不錯(cuò)的文章,也常有用戶循著文獻(xiàn)的痕跡找到Solarbio的產(chǎn)品進(jìn)行采購使用。本期為大家介紹最為常見的產(chǎn)品類型之一—抗生素。
抗生素(Antibiotics)是由微生物(包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬)或高等動(dòng)植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物或人工合成的類似物,能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。在篩選穩(wěn)定表達(dá)株、抑制微生物或腫瘤細(xì)胞、調(diào)節(jié)細(xì)胞等方面發(fā)揮重要作用。
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Solarbio小分子系列的抗生素種類多、范圍廣、性價(jià)比高,包含氨芐、兩性霉素、G-418、慶大霉素等常用的抗生素,可廣泛用于篩選、抑菌、誘導(dǎo)表達(dá)、細(xì)胞活力測(cè)定等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
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抗生素特點(diǎn)
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01
直接作用于菌體細(xì)胞
抗生素則能選擇性地作用于菌體細(xì)胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)的特定環(huán)節(jié),干擾細(xì)胞的代謝作用,妨礙生命活動(dòng)或使停止生長(zhǎng),甚至死亡。
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02
具有選擇性抗生譜
抗生素的作用具有選擇性,不同抗生素對(duì)不同病原菌的作用不一樣。對(duì)某種抗生素敏感的病原菌種類稱為該抗生素的抗生譜(抗菌譜)。
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03
有效作用濃度
抗生素是一種生理活性物質(zhì)。各種抗生素一般都在很低濃度下對(duì)病原菌就發(fā)生作用。各種抗生素對(duì)不同微生物的有效濃度各異,通常以抑制微生物生長(zhǎng)的最少濃度作為抗生素的抗菌強(qiáng)度,簡(jiǎn)稱有效濃度。
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抗生素作用機(jī)理
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1
阻礙細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,導(dǎo)致細(xì)菌在低滲透壓環(huán)境下膨脹破裂死亡。
2
與細(xì)菌細(xì)胞膜相互作用,增強(qiáng)細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性、打開膜上的離子通道,讓細(xì)菌內(nèi)部的有用物質(zhì)漏出菌體或電解質(zhì)平衡失調(diào)而死。
3
與細(xì)菌核糖體或其反應(yīng)底物(如tRNA、mRNA)相互作用,抑制蛋白質(zhì)的合成。
4
阻礙細(xì)菌DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,阻礙DNA復(fù)制將導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞分裂繁殖受阻,阻礙DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA則導(dǎo)致后續(xù)的mRNA翻譯合成蛋白的過程受阻。
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優(yōu)秀“員工”展
G-418 disulfate(IG0010)是一種氨基糖苷類抗生素,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染經(jīng)常使用的抗性篩選試劑。通過抑制轉(zhuǎn)座子Tn601,Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生毒素。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G-418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。
一般的,篩選哺乳動(dòng)物細(xì)胞,推薦起始篩選濃度為400μg/mL;篩選植物細(xì)胞,推薦起始篩選濃度為10μg/mL;篩選酵母,推薦起始濃度為500μg/mL。根據(jù)起始濃度的效果可以再適當(dāng)升高或降低G-418的工作濃度。
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嘌呤霉素是一種抑制protein synthesis的氨基糖苷類抗生素,能夠特異地抑制原核和真核核糖體上的肽鏈轉(zhuǎn)移,常用于篩選特定攜帶pac基因質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。在某些特定情況下,嘌呤霉素亦可以用來篩選轉(zhuǎn)化攜帶pac基因質(zhì)粒的大腸桿菌菌株。
一般的,篩選哺乳動(dòng)物細(xì)胞推薦篩選濃度為1-10 μg/mL,最佳濃度建議通過殺滅曲線來確定;大腸桿菌:LB瓊脂培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化pac基因的大腸桿菌,使用濃度為125μg/mL。(注:使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩(wěn)轉(zhuǎn)株需要精確的pH值調(diào)節(jié),而且受宿主細(xì)胞本身的影響。)
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潮霉素B是一種抑制原核和真核細(xì)胞的氨基糖苷類抗生素,通過干擾移位、促進(jìn)70S核糖體的誤譯來抑制蛋白質(zhì)合成。潮霉素B是一種非常有用的選擇性標(biāo)記,用來篩選和維持培養(yǎng)成功轉(zhuǎn)染潮霉素抗性基因的原核或者真核細(xì)胞。
一般的,潮霉素B用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000 μg/mL。哺乳動(dòng)物細(xì)胞:50-500 μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞:20-200 μg/mL;真菌:300-1000μg/mL。(對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線來確定最佳篩選濃度。)
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殺稻瘟菌素是一種常用抗生素,也是DNA和蛋白質(zhì)合成的抑制劑,可用于篩選攜帶brs或BSD抗性基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
一般的,E. coli推薦使用濃度為50-100μg/mL;哺乳動(dòng)物細(xì)胞推薦使用濃度為1-50μg/mL。初次實(shí)驗(yàn)建議通過殺滅曲線來確定最佳使用濃度。
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