
Solarbio作為一家全國先進的小分子化合物供應商,其產品的安全性和有效性已經被大量文獻證實,僅2021年SCI發表文獻中,使用索萊寶產品的文獻近10000篇,在Nature、Cell等頂級刊物上的文章也層出不窮。同時,我們提供詳盡的化學信息和生物學信息,并提供說明書、MSDS、質量報告等文件,旨在打造令客戶滿意的放心平臺。
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Solarbio小分子化合物系列產品已推出了數年,期間不少產品被用戶頻繁的訂購,并發表了不錯的文章,也常有用戶循著文獻的痕跡找到Solarbio的產品進行采購使用。本期為大家介紹最為常見的產品類型之一—抗生素。
抗生素(Antibiotics)是由微生物(包括細菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產物或人工合成的類似物,能干擾其他生活細胞發育功能的化學物質。在篩選穩定表達株、抑制微生物或腫瘤細胞、調節細胞等方面發揮重要作用。
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Solarbio小分子系列的抗生素種類多、范圍廣、性價比高,包含氨芐、兩性霉素、G-418、慶大霉素等常用的抗生素,可廣泛用于篩選、抑菌、誘導表達、細胞活力測定等相關實驗。
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抗生素特點
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01
直接作用于菌體細胞
抗生素則能選擇性地作用于菌體細胞DNA、RNA和蛋白質合成系統的特定環節,干擾細胞的代謝作用,妨礙生命活動或使停止生長,甚至死亡。
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02
具有選擇性抗生譜
抗生素的作用具有選擇性,不同抗生素對不同病原菌的作用不一樣。對某種抗生素敏感的病原菌種類稱為該抗生素的抗生譜(抗菌譜)。
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03
有效作用濃度
抗生素是一種生理活性物質。各種抗生素一般都在很低濃度下對病原菌就發生作用。各種抗生素對不同微生物的有效濃度各異,通常以抑制微生物生長的最少濃度作為抗生素的抗菌強度,簡稱有效濃度。
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抗生素作用機理
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1
阻礙細菌細胞壁的合成,導致細菌在低滲透壓環境下膨脹破裂死亡。
2
與細菌細胞膜相互作用,增強細菌細胞膜的通透性、打開膜上的離子通道,讓細菌內部的有用物質漏出菌體或電解質平衡失調而死。
3
與細菌核糖體或其反應底物(如tRNA、mRNA)相互作用,抑制蛋白質的合成。
4
阻礙細菌DNA的復制和轉錄,阻礙DNA復制將導致細菌細胞分裂繁殖受阻,阻礙DNA轉錄成mRNA則導致后續的mRNA翻譯合成蛋白的過程受阻。
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優秀“員工”展
G-418 disulfate(IG0010)是一種氨基糖苷類抗生素,是穩定轉染經常使用的抗性篩選試劑。通過抑制轉座子Tn601,Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞產生毒素。當neo基因被整合進真核細胞DNA后,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G-418的選擇性培養基中生長。
一般的,篩選哺乳動物細胞,推薦起始篩選濃度為400μg/mL;篩選植物細胞,推薦起始篩選濃度為10μg/mL;篩選酵母,推薦起始濃度為500μg/mL。根據起始濃度的效果可以再適當升高或降低G-418的工作濃度。
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嘌呤霉素是一種抑制protein synthesis的氨基糖苷類抗生素,能夠特異地抑制原核和真核核糖體上的肽鏈轉移,常用于篩選特定攜帶pac基因質粒的哺乳動物穩定轉染細胞株。在某些特定情況下,嘌呤霉素亦可以用來篩選轉化攜帶pac基因質粒的大腸桿菌菌株。
一般的,篩選哺乳動物細胞推薦篩選濃度為1-10 μg/mL,最佳濃度建議通過殺滅曲線來確定;大腸桿菌:LB瓊脂培養基篩選穩定轉化pac基因的大腸桿菌,使用濃度為125μg/mL。(注:使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩轉株需要精確的pH值調節,而且受宿主細胞本身的影響。)
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潮霉素B是一種抑制原核和真核細胞的氨基糖苷類抗生素,通過干擾移位、促進70S核糖體的誤譯來抑制蛋白質合成。潮霉素B是一種非常有用的選擇性標記,用來篩選和維持培養成功轉染潮霉素抗性基因的原核或者真核細胞。
一般的,潮霉素B用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型、培養基、生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000 μg/mL。哺乳動物細胞:50-500 μg/mL;細菌/植物細胞:20-200 μg/mL;真菌:300-1000μg/mL。(對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線來確定最佳篩選濃度。)
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殺稻瘟菌素是一種常用抗生素,也是DNA和蛋白質合成的抑制劑,可用于篩選攜帶brs或BSD抗性基因的轉染細胞。
一般的,E. coli推薦使用濃度為50-100μg/mL;哺乳動物細胞推薦使用濃度為1-50μg/mL。初次實驗建議通過殺滅曲線來確定最佳使用濃度。
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