化學發光的基本原理與應用指導-分析方法-資訊-生物在線

化學發光的基本原理與應用指導

作者:北京五洲東方科技發展有限公司 2011-05-05T00:00 (訪問量:15218)

  基本原理
  化學發光(Chemiluminescense)是A、B兩種物質發生化學反應生成C物質,反應釋放的能量被C物質的分子吸收并躍遷至激發態C*,處于激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。因化學反應過程中伴隨光輻射現象,故稱為化學發光。在生物學領域常被用來檢測蛋白質與DNA,反應過程中不需要紫外光等激發光源,是依靠HRP或AP等特定的酶與底物結合而推進反應的發生。通常產生的光輻射非常微弱,光信號不易采集。即使對反應過程進行連續曝光,但因成像質量不佳,而無法進行準確的定量分析。

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  現在,隨著CCD成像技術的不斷完善,使得對微弱信號的靈敏度大大提高,因此對化學發光結果的定量分析已不再是一件難事。法國VILBER公司生產的Fusion成像系統可以為化學發光用戶提供最好的曝光圖片,再結合Bio-1D軟件強大的分析功能,可為用戶提供最準確的定量分析。
  應用展示
  1.ELC Western blot


  樣本:帶有過氧化物酶二抗標記的鼠免疫球蛋白
  方法:Western blot / PVDF膜
  底物:ECL
  曝光時間:5分鐘
  儀器:Fusion FX5

  2.CDP Star—Dot blot


  樣本:地高辛標記的DNA探針與Fab片斷雜交樣本
  方法:Dot blotting / PVDF膜
  底物:CDP Star
  曝光時間:1 分鐘
  儀器:Fusion FX7

  3.Luciferase assay


  樣本:熒光素酶(Luciferase)檢測樣本
  方法:Petri dish
  底物:熒光素
  曝光時間:3 分鐘
  儀器:Fusion FX5
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