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一、試劑盒說明?

? WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)，在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被還原成橙黃色水溶性的甲月贊。WST-8被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲月贊能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的甲月贊量與活細胞數(shù)量成正比。

CCK-8法是用于測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數(shù)目的一種高靈敏度，無放射性的比色檢測法。實驗的靈敏度比其它四唑鹽如MTT, XTT, MTS或WST -1高。由于CCK-8溶液相當穩(wěn)定，并且對細胞沒有毒性，可直接加入到細胞樣品中長時間孵育。

二、試劑盒組份

三、試劑盒以外自備儀器和試劑

低速離心機 、酶標儀（450nm波長）、平板搖床、微量移液器、96孔板

四、 注意事項

1. 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，如果待檢測體系中存在較多的還原劑，例如一些抗氧化劑會干擾檢測，需設(shè)法去除。

2. 如果待測溶液有還原性，測定不含細胞，但含有CCK-8的待測溶液在450 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入CCK-8 ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的100 μl培養(yǎng)基和10 μl CCK-8進行檢測。

3. 用酶標儀檢測前請確保孔內(nèi)沒有氣泡，否則會干擾測定。

4. 為保證您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

五、 操作方法

1. 96孔板加入細胞100μL/孔（約1×10⁴），置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。

2.加入適當濃度的受試化合物。

3.將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4.?向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液。

5.?37℃下孵育1～4小時。

6.?酶標儀在450nm波長處檢測每孔的光密度。

7.結(jié)果分析?

(1) 細胞的存活率：將各測試孔的OD值減去本底OD值（完全培養(yǎng)基加CCK-8，無細胞）或空白藥物孔OD值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加CCK-8，無細胞），各重復(fù)孔的OD值取均數(shù)±SD。

細胞的存活率以T/C%表示，T為加藥細胞的OD值，C為對照細胞的OD值。

細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

??????? (2) 求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC₅₀)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC₉₀)。

凱基相關(guān)產(chǎn)品（詳見凱基網(wǎng)站www.keygentec.com.cn）

細胞株、細胞提取物及細胞培養(yǎng)產(chǎn)品

¨???????? ??人類腫瘤細胞株

¨???????? ???鼠腫瘤細胞株

¨???????? ???正常細胞株

¨???????? ???腫瘤耐藥細胞株

¨???????? ???細胞提取物（RNA/DNA/蛋白）

¨???????? ???細胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品

細胞凋亡

一、細胞凋亡研究試劑盒

¨???????? Annexin V-FITC/ EGFP/PE細胞凋亡檢測試劑盒

¨???????? TUNEL凋亡原位檢測系列試劑盒

¨???????? Caspase系列細胞凋亡檢測試劑盒

¨???????? 線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1）

¨???????? TRAP-PCR端粒酶活性檢測試劑盒

¨???????? DNA Ladder檢測試劑盒

二、細胞凋亡相關(guān)抗體

三、凋亡誘導(dǎo)劑、抑制劑

四、氧化應(yīng)激損傷檢測試劑盒

五、細胞凋亡研究輔助試劑

細胞增殖/毒性/活力與細胞周期

¨???????? 凱基細胞周期檢測試劑盒

¨???????? MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

¨???????? XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑

¨???????? WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

¨???????? CCK-8試劑盒

¨???????? CFSE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒

細胞染色產(chǎn)品

¨???????? 活細胞/凋亡細胞/壞死細胞鑒別試劑盒（AO/EB法.熒光顯微鏡）

¨???????? 凱基細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒

¨???????? 羅丹明123染色試劑盒

¨???????? DAPI染色試劑盒

¨???????? Hoechst 33258染色試劑盒

¨???????? Hoechst 33342/PI雙染試劑盒

¨???????? 吖啶橙染色試劑盒

¨???????? PI染色試劑盒

¨???????? EB染色試劑盒

¨???????? 7-AAD染色試劑盒

亞細胞組分制備

¨???????? 細胞核制備試劑盒

¨???????? 線粒體提取試劑盒

¨???????? 細胞懸液制備試劑盒（組織消化試劑盒）