血清使用時的一些注意事項，您都知道嗎？-產品資訊-資訊-生物在線

血清使用時的一些注意事項，您都知道嗎？

作者：上海聯碩生物科技有限公司 2020-10-14T16:40 (訪問量:8019)

一、儲存條件
血清一般儲存于－20℃，同時應避免反復凍融。若存放于4℃時，請勿超過一個月。

二、血清中絮狀沉淀的處理
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白，這是正常特性，不會影響產品性質。
離心血清（400g，1-2分鐘）或簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里。
大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。
一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾。

三、使用濃度
一般為5－20％，最常用是10％。過多血清容易使培養中的細胞發生變化，特別是一些二倍體的無限細胞系，迅速生長之后容易發生惡性轉化。

四、解凍方法
血清從冰箱取出后應慢慢地解凍。最好在4℃低溫冰箱里放置一天或直到完全融化為止。如果時間不允許低溫解凍, 可參考以下解凍方法：
1. 將血清從冰箱里取出后，在室溫下放置15-20分鐘。
2. 然后將血清放置在37℃水浴槽里。過高溫度會導致血清出現渾濁現象。不要讓水淹沒裝有血清的瓶子。
3. 每隔5分鐘左右適當搖晃瓶子，直到完全地解凍為止。

五、熱滅活方法
加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究，培養ES細胞、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
1. 用上述描述的方法將血清在低溫冰箱或室溫下解凍。
2. 在血清解凍時，將一個容器裝入適量的水，用于模擬裝有血清瓶子在熱處理過程中檢測瓶內水的溫度。容器大小、質地和裝水的量最好與裝血清的瓶子相同或相似。
3. 待血清徹底解凍時，將含有血清的瓶子放在預熱的56℃水浴里，不要將含有血清的瓶子讓水淹沒或接近瓶子的蓋子，以免導致污染。
4. 在開始加熱處理時，要及時使用溫度計測定模擬瓶內水的溫度。
5. 在預熱期間，每隔3-5分鐘要適當搖晃含有血清和水的瓶子，確保瓶內液體均勻加熱。
6. 一旦模擬瓶內的水溫達到55.8±0.5℃時，開始計時，并在此溫度范圍內熱處理30分鐘，然后立即放在冰上冷卻。
為防止在熱處理過程中由蛋白質變性而導致的渾濁和沉淀現象，熱處理時應注意下列事項：
1. 不要用高于25℃以上的溫度加快解凍速度。
2. 在熱處理之前，要使血清徹底融解。
3. 不要使熱處理的溫度高于56.3℃
4. 熱處理時間不要長于30分鐘。
5. 在加熱過程中一定要定時搖動血清。

六、避免事項
1.避免反復凍融
長時間儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。
2.避免產生沉淀
解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。
血清分裝時，須規則搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一。
勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。
勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質。

七、建議事項
一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時，您應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。（100U/mL青霉素；100μg/mL鏈霉素）

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