堿性磷酸酶檢測試劑盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一種用于快速、便捷地檢測細胞或組織樣品的裂解或勻漿產物的上清液、血清、血漿、尿液等樣品中內源性的堿性磷酸酶活性的試劑盒。
堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)也稱堿性***酶(EC 3.1.3.1)，可以在堿性條件下催化***鍵的水解。哺乳動物中，肝臟、膽管、腎臟、骨頭和胎盤中的堿性磷酸酶活性比較高。常見的堿性磷酸酶包括腸道堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非組織特異性堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盤堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也稱placental alkaline phosphatase, PLAP)。常見的小牛腸堿性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被廣泛用于二抗等的標記最終用于蛋白和核酸等的檢測，也常用于DNA或RNA 5'和3'末端的去磷酸化(去單磷酸化)，特別是質粒的5'末端去磷酸化以避免質粒自連等。
干細胞，如iPS中，堿性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS成功誘導的標志。另外，分化的結腸癌細胞中堿性磷酸酶的活性也會顯著升高，被當作結腸癌細胞分化程度定性和定量的指標。此外，血清中堿性***酶的升高，被稱作高堿性磷酸酶血癥(hyperalkalinephosphatasemia)，被認為和惡性膽管阻塞(malignant biliary obstruction)、原發性膽管硬化(primary biliary cirrhosis)、原發性硬化膽管炎(primary sclerosing cholangitis)、肝淋巴瘤(hepatic lymphoma)和肝肉瘤(hepatic sarcoidosis)等肝膽疾病密切相關。血清中堿性磷酸酶活性升高還和骨頭生成密切相關，因為堿性磷酸酶是成骨細胞的副產物。血清中堿性磷酸酶活性過低也和一些疾病相關。兒童和孕婦血清中的堿性磷酸酶活性較普通人高一些。血清中堿性磷酸酶活性范圍在20-140U/L。
除胎盤堿性磷酸酶(alkaline phosphatase placental isoform)以外，其它的內源性堿性磷酸酶加熱后易失活。
本試劑盒可以檢測細胞或組織樣品的裂解或勻漿產物的上清液、血漿、血清、尿液或純化的酶樣品等中的堿性磷酸酶活性。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物，在堿性條件下，可在堿性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol(p-nitrophenol)在堿性條件下，呈黃色產物，可以在400-415nm檢測吸光度。產物黃色越深，說明堿性磷酸酶檢活性越高，反之則酶活性越低。據此通過比色分析就可以計算出堿性磷酸酶活性水平。
包括標準品和空白對照，本試劑盒P0321S包裝共可進行100個樣品的檢測，P0321M包裝共可進行500個樣品的檢測。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存，一年有效。其中顯色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事項：
如果希望進行酶活性的絕對定量，進行酶反應時必須注意精確計時。此時推薦采用孵育30分鐘等較長的時間，以減小操作過程中的時間誤差。同時如果樣品中酶活性較高，則可以預先適當稀釋樣品。
樣品溶液中須避免出現EDTA、氟離子、檸檬酸鹽等堿性磷酸酶的抑制劑。
檢測緩沖液和p-nitrophenol溶液對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。反應終止液有腐蝕性，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。