實驗細胞保持正常狀態是實驗成功的基石。您在蛋白表達敲低、藥物處理或特殊培養細胞之后,是否有過第一次實驗結果令您特別興奮、卻在之后的重復實驗中發現了偏差而令您的心情一落千丈的經歷?這是這跟您樣本中死亡細胞的水平有關。這也是我們今天想要說的一個話題——定期檢測細胞活性,隨時關注細胞狀態。即便這組數據不是您課題中所必須的,但它卻是您控制實驗的有效手段。

細胞活性是指樣本群體中健康細胞所占的比例。細胞活性的檢測對于觀察實驗過程中細胞的生理狀態是必須的。細胞活性會受環境因素影響,包括細胞培養各參數的改變、藥物和生長因子的刺激以及在各種疾病下作出的反應。例如,癌細胞表現出細胞活性加強,進而引起細胞異常增殖及逃避細胞凋亡,與之相反的是,神經退行性和其他組織退行性疾病則以進行性細胞丟失為特征。損傷和感染也會對細胞存活產生負面影響,導致壞死或凋亡。以上,細胞本身的健康與疾病之間的關系案例,警示我們在不同實驗背景和模型系統中測量細胞活性十分必要。
科學家們已經開發了用于不同實驗平臺的多種檢測細胞活性的技術。具體來說,細胞檢測可以根據檢測原理進行分組,包括細胞增殖、質膜完整性、代謝活性和線粒體功能。我們除了通過活性檢測快速查看細胞群體的總體健康狀況,還可以達到更深層的需求,就是通過它來確定活性受損時細胞的死亡方式 - 細胞凋亡還是壞死。
XTT 檢測(XTT Cell Viability Kit #9095)是一種可用于檢測細胞活性的代謝性檢測方法。在健康細胞中,XTT 通過線粒體酶轉換成橙色的甲瓚染料。接著通過檢測 450 nm 處的相對吸光度來估計活細胞數量。這種方法的優點之一是操作簡單, 不需要細胞固定、通透或二次檢測方法,并且能夠在分析后還能繼續檢查細胞。
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