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1．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

操作程序

1.?標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。)

2.?根據(jù)代測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3.?加樣：1）空白孔，空白對(duì)照孔不加樣品，生物素標(biāo)記的抗EPI抗體，鏈霉親和素-HRP，只加顯色劑A&B和終止液，其余各步操作相同；2）標(biāo)準(zhǔn)品孔：加入標(biāo)準(zhǔn)品50ul，鏈霉親和素-HRP50ul(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體，故不加)；3）代測(cè)樣品孔：加入樣本40ul，然后各加入抗EPI抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul，蓋上封板膜，輕輕震蕩混勻，37℃溫育60分鐘。

4.?配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.?洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.?顯色：每孔先加入顯色劑A50ul，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.?

7.?終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

8.?測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。?測(cè)定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

9.?根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。

操作程序總結(jié)：

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和15%

檢測(cè)范圍：

檢測(cè)范圍：7pg/ml-200pg/ml

保存條件及有效期：

保存：2-8℃。

有效期：6個(gè)月(2-8℃)。

大鼠腎上腺素（EPI）酶聯(lián)免疫

? ??檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)? ??AE91026Ra

使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理，來(lái)檢測(cè)大鼠腎上腺素（EPI），只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

用? 途：用于大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腎上腺素（EPI）測(cè)定。

工作原理

本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定樣品中大鼠腎上腺素（EPI）水平。向預(yù)先包被了大鼠腎上腺素（EPI）單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入大鼠腎上腺素（EPI），溫育；溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗EPI抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中大鼠腎上腺素（EPI）的濃度呈正相關(guān)。

試劑盒組成?

需要而未提供的試劑和器材

1．?37℃恒溫箱。