Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒?
品牌：Solarbio | 貨號：P1320
| 商品貨號： | 商品品牌： | 規格 | 基本售價： | 選擇規格 |
|---|---|---|---|---|
| P1320-25T | Solarbio | 25T | 300.00元 | |
| P1320-50T | Solarbio | 50T | 450.00元 | |
| P1320-100T | Solarbio | 100T | 800.00元 |
| 英文名稱 | Tris-Tricine-SDS-PAGE |
|---|---|
| 儲存條件 | 2-8℃，避光,有效期1年 |
| 單位 | 盒 |
產品簡介：常規的Tris-SDS-PAGE電泳的只能分辨大分子蛋白，對于相對分子量小的，尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率極低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分離分子量在1-10 kD的蛋白及多肽，成為目前電泳法變性分離多肽的主要方法。本產品包括Tricine-SDS- PAGE 凝膠制備所需全套試劑，只需自備蒸餾水，即可制備高質量各種濃度的凝膠，方便、快捷，電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實驗。。
注意事項：
1、10%APS配制后分裝-20 度保存。APS溶液不穩定，應盡量減少室溫存放時間，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若發現凝膠聚合時間延長，應考慮更換，使用-20 度保存的10%APS。
2、在凝膠配制過程中，尤其是液體混勻步驟，應盡量避免氣泡的產生。
3、在分離膠上層加蒸餾水時要小心操作，加水時速度不能太快。
4、丙烯酰胺具有神經毒性，操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。
5、本產品僅用于科研，不能用于人體實驗或人體治療。
配膠說明：
根據目的蛋白分子量大小選擇合適的 PAGE 分離膠配制濃度，凝膠濃度配方參考附表。
I 配制分離膠?
1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 6%C 、凝膠緩沖液和甘油加入到離心管中混合。?
2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑，立即渦旋混勻 5-10 秒，以使溶液充分混勻。?
3、在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液（1 mm mini-gel，分離膠溶液加約 4 ml ），然后在分離膠溶液上輕輕
覆蓋一層 1-3 cm 的水層，使凝膠表面保持平整。?
4、靜置，待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。
II 配制夾層膠?
去除覆蓋在分離膠上的水層，用濾紙將殘留的水盡量吸去。?
1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。?
2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑，立即渦旋混勻 5-10 秒，以使溶液充分混勻。?
3、將適量的夾層膠溶液迅速加至分離膠的上面（對于 1 mm 的 mini-gel，夾層膠溶液加約 1 ml ）， 然后在夾層
膠溶液上輕輕覆蓋一層水層，使凝膠表面保持平整。?
4、靜置，待夾層膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。?
III 配制濃縮膠?
去除覆蓋在夾層膠上的水層，用濾紙將殘留的水吸去。?
1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。?
2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑，立即渦旋混勻 5-10 秒，以使溶液充分混勻。
?3、將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡。?
4、待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。?
5、進行電泳操作。?
IV 電泳
將電泳槽放入 4℃或冰水浴中，外槽加入陽極緩沖液（T1225），內槽加入陰極緩沖液（T1215），30V 預電泳 10min，
將樣品（已經過 Tricine 專用上樣緩沖液 P1325 處理）加入點樣孔后 30V 電泳 1 小時，100V 電泳至溴酚藍到達膠底
部后停止電泳，進行后續的考馬斯亮藍染色或電轉。?
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