Taq DNA Polymerase說明書-其它資料-資訊-生物在線

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Taq DNA Polymerase說明書

作者:北京索萊寶科技有限公司 2014-09-17T00:00 (訪問量:8973)

北京索萊寶科技有限公司 張凈花 010-56371206 ?13426459985

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一、產(chǎn)品基本信息:

貨號(hào):PC1100

規(guī)格:500U/1000U/2500U

濃度:5U/ul

保存:-20℃保存, 有效期至少一年。

二、產(chǎn)品簡介: Taq DNA Polymerase是從克隆有Thermus aquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)后分離純化的,其分子量為94 KD。該酶具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’核酸外切酶活性,無3’-5’外切酶活性。在PCR反應(yīng)中,Taq DNA Polymerase延伸速度為1-2 kb/分鐘,產(chǎn)物3’端帶A,可直接用于T/A載體克隆。該酶無外源核酸酶和細(xì)菌基因組DNA的污染,穩(wěn)定性好,特異性強(qiáng)。

三、活性定義: 1單位(U) Taq DNA Polymerase活力定義為在74℃,30分鐘內(nèi),以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板,將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。

四、質(zhì)量控制: SDS-PAGE檢測Taq DNA Polymerase純度大于99%;經(jīng)檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余DNA;能有效地?cái)U(kuò)增人類基因組中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變。

五、酶貯存緩沖液: 20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol; 穩(wěn)定劑

六、適用范圍: 用于小于6kb的對(duì)保真度要求不高的DN**段的PCR擴(kuò)增、DNA標(biāo)記、引物延伸、序列測定、平末端加A等,產(chǎn)物可以直接用于T/A載體克隆。

七、建議PCR條件:

PCR體系(以50μl反應(yīng)體系為例) Template <0.5μg 上游引物(10μM) 1μl 下游引物(10μM) 1μl 10×Buffer(含Mg2+) 5μl dNTP(各2.5mM) 4μl Taq DNA Polymerase 0.5-1μl ddH2O up to 50μl

八、注意事項(xiàng):

1、PCR反應(yīng)體系加樣時(shí),最后一步加入Taq DNA Ploymerase,整個(gè)過程宜在冰上操作。

2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反應(yīng)時(shí),請用高壓滅菌處理過的吸頭。

3、10×Taq Buffer分為含15 mM Mg2+和不含Mg2+兩種,不含Mg2+的Buffer,另外配有25 mM MgCl2。如果沒有

特別指定,通常提供的為含有15 mM Mg2+的Buffer。

九、相關(guān)產(chǎn)品:

PC1120 2×Taq PCR MasterMix (含染料)

PC1300 Pfu DNA Polymerase

PC2200 dNTPs Mix(10mM each)

D1020 10×DNA上樣緩沖液

T1060 50×TAE 緩沖液

G8142 GoldView II型核酸染色劑(5000×)

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