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一、產品基本信息:
貨號:PC1100
規格:500U/1000U/2500U
濃度:5U/ul
保存:-20℃保存, 有效期至少一年。
二、產品簡介: Taq DNA Polymerase是從克隆有Thermus aquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌經誘導表達后分離純化的,其分子量為94 KD。該酶具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’核酸外切酶活性,無3’-5’外切酶活性。在PCR反應中,Taq DNA Polymerase延伸速度為1-2 kb/分鐘,產物3’端帶A,可直接用于T/A載體克隆。該酶無外源核酸酶和細菌基因組DNA的污染,穩定性好,特異性強。
三、活性定義: 1單位(U) Taq DNA Polymerase活力定義為在74℃,30分鐘內,以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板,將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質所需的酶量。
四、質量控制: SDS-PAGE檢測Taq DNA Polymerase純度大于99%;經檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余DNA;能有效地擴增人類基因組中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變。
五、酶貯存緩沖液: 20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol; 穩定劑
六、適用范圍: 用于小于6kb的對保真度要求不高的DN**段的PCR擴增、DNA標記、引物延伸、序列測定、平末端加A等,產物可以直接用于T/A載體克隆。
七、建議PCR條件:
PCR體系(以50μl反應體系為例) Template <0.5μg 上游引物(10μM) 1μl 下游引物(10μM) 1μl 10×Buffer(含Mg2+) 5μl dNTP(各2.5mM) 4μl Taq DNA Polymerase 0.5-1μl ddH2O up to 50μl
八、注意事項:
1、PCR反應體系加樣時,最后一步加入Taq DNA Ploymerase,整個過程宜在冰上操作。
2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反應時,請用高壓滅菌處理過的吸頭。
3、10×Taq Buffer分為含15 mM Mg2+和不含Mg2+兩種,不含Mg2+的Buffer,另外配有25 mM MgCl2。如果沒有
特別指定,通常提供的為含有15 mM Mg2+的Buffer。
九、相關產品:
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