人白細(xì)胞介素1（IL-1）酶聯(lián)免疫檢測(cè)
試劑盒使用說(shuō)明書
使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理，來(lái)檢測(cè)人白細(xì)胞介素1（IL-1），只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
用??? 途：用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素1（IL-1）的測(cè)定。
工作原理
本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定樣品中人白細(xì)胞介素1（IL-1）水平。向預(yù)先包被了人白細(xì)胞介素1（IL-1）單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入白細(xì)胞介素1（IL-1），溫育；溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗IL-1抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中人白細(xì)胞介素1（IL-1）的濃度呈正相關(guān)。
試劑盒組成
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試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
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說(shuō)明書 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
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密封袋 |
1個(gè) |
1個(gè) |
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酶標(biāo)包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
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標(biāo)準(zhǔn)品：320ng/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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鏈霉親和素-HRP |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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生物素標(biāo)記的抗IL-1抗體 |
0.5ml×1瓶 |
1 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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濃縮洗滌液 |
（20ml×20倍）×1瓶 |
（20ml×30倍）×1瓶 |
2-8℃保存 |
需要而未提供的試劑和器材
1．??? 37℃恒溫箱。
2．??? 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3．??? 精密移液器及一次性吸頭
4．??? 蒸餾水，
5．??? 一次性試管
6．??? 吸水紙
注意事項(xiàng)
1．??? 從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．??? 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差
3．??? 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
4．??? 為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
5．??? 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
6．??? 底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中
標(biāo)本要求
1．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作程序
1.?????? 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。)
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160 ng/L |
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 |
120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
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80 ng/L |
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 |
120μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
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40 ng/L |
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