大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）酶聯免疫
檢測試劑盒使用說明書??
AE91023Ra??
使用前仔細閱讀本說明書。本酶聯免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術原理，來檢測大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL），只能用于研究用途，不得用于醫學診斷。
用??途：用于大鼠血清、血漿及相關液體樣本中核因子κB受體活化因子配基（RANKL）測定。?
工作原理：
本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）測定樣品中大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）水平。向預先包被了大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）單克隆抗體的酶標孔中加入大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL），溫育；溫育后，加入生物素標記的抗核因子κB受體活化因子配基（RANKL）抗體。再與鏈霉親和素-HRP結合，形成免疫復合物，再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶，然后加入底物A、B，產生藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）的濃度呈正相關。
試劑盒組成?
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | ? |
封板膜 | 2片（48） | 2片（96） | ? |
密封袋 | 1個 | 1個 | ? |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品960 pmol/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
鏈霉親和素-HRP | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
生物素標記的抗RANKL抗體 | 0.5ml×1瓶 | 1?ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | （20ml×20倍）×1瓶 | （20ml×30倍）×1瓶 | 2-8℃保存 |
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需要而未提供的試劑和器材?
1．?37℃恒溫箱。
2．?標準規格酶標儀。
3．?精密移液器及一次性吸頭
4．?蒸餾水，
5．?一次性試管
6．?吸水紙
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注意事項
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1．?從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．?各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差
3．?嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
4．?為避免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。
5．?不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
6．?底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
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洗板方法
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手工洗板方法：甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。
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自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中
標本要求?
1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
操作程序
1.?標準品的稀釋：(本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。)
480 pmol/L | 5號標準品 | 120μl的原倍標準品加入120μl標準品稀釋液 |
240 pmol/L | 4號標準品 | 120μl的5號標準品加入120μl標準品稀釋液 |
120 pmol/L | 3號標準品 | 120μl的4號標準品加入120μl標準品稀釋液 |
60 pmol/L | 2號標準品 | 120μl的3號標準品加入120μl標準品稀釋液 |
30 pmol/L |
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