二油酰丙基氯化三甲銨DOTMA，作為生物藥中的RNA脂質(zhì)體處方磷脂你了解多少？本期AVT小編給你介紹RNA脂質(zhì)體磷脂中相當(dāng)重要的一款磷脂-陽(yáng)離子脂質(zhì)材料DOTMA。
近年來(lái)基因療法、抗體療法、免疫療法等概念鋪天蓋地，隨之大熱的基因遞送成為研究焦點(diǎn)。專(zhuān)注輔料開(kāi)發(fā)的AVT小編本以為這是一個(gè)新興領(lǐng)域，沒(méi)想到簡(jiǎn)單調(diào)研后卻發(fā)現(xiàn)早在三十多年前科研工作者就已經(jīng)成功利用陽(yáng)離子脂質(zhì)輔料制備脂質(zhì)體用于基因轉(zhuǎn)染了。本文要介紹的主角DOTMA就有著這樣的背景。
DOTMA誕生于1987年，由Felgner等人合成出來(lái)并應(yīng)用于DNA的遞送。研究發(fā)現(xiàn)，DOTMA制備的單室脂質(zhì)體可高效包載DNA和RN**段，包封率達(dá)100%，并且能夠很好的被細(xì)胞攝取進(jìn)而表達(dá)目標(biāo)基因，細(xì)胞水平上的轉(zhuǎn)染效率較DOTAP高10倍。處方也更簡(jiǎn)單，不需要添加DOPE等helper lipid。然而DOTMA早先并沒(méi)有被國(guó)內(nèi)陽(yáng)離子脂質(zhì)體研究者所熟知，反而DOTAP、DC-CHOL等應(yīng)用更多。
DOTMA中文名二油酰丙基氯化三甲銨，構(gòu)效關(guān)系上兩條脂肪酸短鏈（C14）組成的脂質(zhì)體較長(zhǎng)鏈（C16或C18）有著更好的轉(zhuǎn)染效果，結(jié)構(gòu)式如下：
容易與它混淆的DODMA是1，2-二油酰氧基-3-二甲基氨基丙烷，兩者銨離子價(jià)位不同，帶電荷密度不同，自然在用法和效果方面也不一樣。
RNA類(lèi)藥物的效果與選用的陽(yáng)離子脂質(zhì)材料密切相關(guān)，實(shí)驗(yàn)中遇到問(wèn)題的時(shí)候不妨多試幾種陽(yáng)離子脂質(zhì)材料呀。最后附上DOTMA的基本信息：
1、通用名稱(chēng)：DOTMA
2、商品名：DOTMA
3、中文名稱(chēng)：二油酰丙基氯化三甲銨
4、化學(xué)名稱(chēng)：1,2-雙十八烯氧基-3-甲基銨丙烷 （氯鹽）
5、CAS號(hào)：104872-42-6
6、生產(chǎn)商：艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司
7、分子式：C42H84ClNO2
8、用途：陽(yáng)離子脂質(zhì)體
9、吸濕性：無(wú)
10、性狀：白色固體
11、純度：96%以上
12、分子量：670.575
13、熔點(diǎn)：35~38℃
14、光敏性：有
15、保存條件：-20℃
二油酰丙基氯化三甲銨DOTMA在RNA脂質(zhì)體中發(fā)揮了怎樣的作用？
DOTMA作為一種性能優(yōu)秀的陽(yáng)離子脂質(zhì)材料被廣泛應(yīng)用于非病毒基因轉(zhuǎn)染，如Invitrogen的轉(zhuǎn)染試劑Lipofectin。相較于DOTAP、DC-CHOL、DODMA等，它在擁有更高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)細(xì)胞毒性也更小，因此在藥用陽(yáng)離子脂質(zhì)體開(kāi)發(fā)中的研究也越來(lái)越多。
DOTMA分子結(jié)構(gòu)上具有“較大尾扇，較小頭部”的特性，在脂質(zhì)體微觀形態(tài)、體內(nèi)穩(wěn)定性以及與細(xì)胞膜相作用等方面較DC-CHOL、DOEPC等更好。DOTAP也具有類(lèi)似的結(jié)構(gòu)性質(zhì)，但DOTAP對(duì)DNA/RNA的包載效率不如DOTMA，在同等藥效下DOTAP劑量要比DOTMA高得多，隨之而來(lái)的細(xì)胞毒性也就更大，安全性不如DOTMA。RNA脂質(zhì)體的效果與其所用陽(yáng)離子脂質(zhì)的飽和度（雙鍵數(shù)量）、側(cè)鏈長(zhǎng)度、頭部基團(tuán)、N價(jià)態(tài)等因素密切相關(guān)，DOTMA正是綜合了這幾方面的優(yōu)勢(shì)，因此具有很好的應(yīng)用特性。一般處方設(shè)計(jì)時(shí)與膽固醇、PC類(lèi)磷脂和PEG化脂質(zhì)合用。
DOTMA的其它應(yīng)用優(yōu)缺點(diǎn)整理如下：
優(yōu)點(diǎn)：
?對(duì)核酸包載效率高，RNA/DOTMA脂質(zhì)復(fù)合物中RNA包封率可達(dá)100%；
?基因轉(zhuǎn)染效率高，某些細(xì)胞上能高出DOTAP處方10倍多；
?細(xì)胞毒性較小，安全性好；
?可GMP大規(guī)模生產(chǎn)。
缺點(diǎn)：
?價(jià)格較高；
?轉(zhuǎn)染效率不如DLin-MC3-DMA等可電離陽(yáng)離子脂質(zhì)；
?目前仍處于實(shí)驗(yàn)室研究階段，沒(méi)有上臨床的產(chǎn)品。
圖表引用自：
R Kola?inac, C Kleusch. Deciphering the Functional Composition of Fusogenic Liposomes. Int. J. Mol. Sci. 2018, 19(2), 346.
陽(yáng)離子脂質(zhì)DOTMA在RNA脂質(zhì)體中的應(yīng)用優(yōu)缺點(diǎn)小編先介紹到這里，更多脂質(zhì)體信息，我們下期再會(huì)！