在實(shí)驗(yàn)室小心翼翼的你,怎奈何體外細(xì)胞的脆弱不堪,百密終有一疏。
你偶然的一個(gè)噴嚏,不經(jīng)意地撩了下秀發(fā),小動(dòng)作一時(shí)爽,細(xì)胞白培養(yǎng)!
預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素,一旦污染不僅浪費(fèi)時(shí)間,而且浪費(fèi)人力、物力,甚至造成無(wú)法彌補(bǔ)的損失。值得慶幸的是并非所有的細(xì)胞污染都是致命的,及時(shí)發(fā)現(xiàn),采取正確的方式力挽狂瀾方為正道!
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的污染不僅僅指微生物,還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對(duì)細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì)。常見(jiàn)的污染主要包括:細(xì)菌、真菌、支原體、黑膠蟲、病毒、原蟲以及非細(xì)菌污染共七種類型,每一種污染都有各自的特點(diǎn),如細(xì)菌和真菌增殖迅速,短時(shí)間內(nèi)會(huì)對(duì)細(xì)菌造成明顯傷害,而支原體和病毒對(duì)細(xì)胞的影響則是一種緩慢長(zhǎng)期的過(guò)程。

叮咚!你有一份細(xì)胞鑒污指南等待查看!
耐思手把手教你鑒別細(xì)胞污染!
1、細(xì)菌、真菌污染檢測(cè)
(1)肉眼觀察
細(xì)菌、真菌污染一般是由傳代、換液、加樣等開放性操作因此,而且增生十分迅速。
若有污染,在48小時(shí)內(nèi)可觀察到明顯特征,例如培養(yǎng)液變混濁,略加振蕩后培養(yǎng)液中有很多漂浮物。
(2)接種觀察
采用普通肉湯接種或用未加雙抗藥物的培養(yǎng)液接種,接種后可明顯觀察到是否有污染。
(3)鏡下觀察
在倒置顯微鏡的高倍鏡下若見(jiàn)培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒漂浮,即可判定為細(xì)菌污染。
若觀察到細(xì)胞之間有絲狀、管狀、樹枝狀或卵形的物質(zhì)即可判定為真菌污染。
2、支原體污染檢測(cè)
(1)相差顯微鏡觀察
直接取少許培養(yǎng)液滴在載物片上,利用顯微鏡觀察。
支原體在鏡下呈暗色微小顆粒,多位于細(xì)胞與細(xì)胞之間,有時(shí)可見(jiàn)類似于布朗運(yùn)動(dòng)的表現(xiàn)。

(2)熒光染色法觀察
用熒光染料Hoechst33258,此染料能與DNA特異性結(jié)合,可使支原體內(nèi)的DNA染色并在熒光顯微鏡下呈綠色小點(diǎn),散在于細(xì)胞周圍或附于細(xì)胞表面。
(3)電鏡檢測(cè)
若條件許可,可在細(xì)胞培養(yǎng)48~72小時(shí),用胰酶消化細(xì)胞制成細(xì)胞懸液后進(jìn)行固定、包埋、切片后可用掃描電鏡或透射電鏡觀察。

(4)培養(yǎng)檢測(cè)
將細(xì)胞懸液5mL加入45mL支原體肉湯培養(yǎng)基,培養(yǎng)14天后觀察肉湯培養(yǎng)有無(wú)霧狀沉淀,然后取0.5ml加入已冷卻到50℃的培養(yǎng)基中,再用瓊脂培養(yǎng)基做分離培養(yǎng),37℃培養(yǎng)3天觀察有無(wú)“荷包蛋”菌落出現(xiàn)。
3、病毒污染檢測(cè)
(1)應(yīng)用電鏡技術(shù)快速診斷動(dòng)物病毒病

(2)逆轉(zhuǎn)錄_聚合酶鏈反應(yīng)RT_PCR檢測(cè)病毒
耐思早已從根源為你預(yù)防細(xì)胞污染!
耐思新增液體輸送系統(tǒng),為制藥、生物技術(shù)和實(shí)驗(yàn)室等提供無(wú)菌輸送解決方案,實(shí)現(xiàn)液體的封閉式導(dǎo)入。
目前 細(xì)胞工廠、搖瓶、方形試劑瓶、離心管等密閉系統(tǒng) 已正式上線,轉(zhuǎn)移蓋一體注塑成型,通用型強(qiáng),永絕細(xì)胞污污污后患,為你的細(xì)胞帶來(lái)全方位的呵護(hù)。




