相信做過 PCR 實驗的伙伴,一定有跟我一樣的感受,坑多,且讓人防不勝防!辛辛苦苦做半天,PCR 做出來還是假陽性......做完 PCR,蒸發了一半,開蓋手抖灑了......PCR 管居然融化變形,蓋打不開了?而且 PCR 擴增效率極低......?令人抓狂是好不容易出一次滿意結果,遲遲不能復現.......「坑」雖多,吐槽完,實驗仍要繼續,如何提前避開才是重中之重。造成這些結果的原因有很多,模板質量不佳、引物、退火溫度不合適等等,但還有一個容易被忽略因素:PCR 耗材,它出問題會導致出現樣品蒸發、漏液等實驗事故,甚至直接導致實驗失敗。PCR 反應是升降溫循環反應,樣品蒸發的影響不容忽視,對于如XG檢測應用的 qPCR 實驗,體系的體積穩定性及透光性對檢測的靈敏度也有干擾。雖然高透的管蓋、8 聯管管蓋起到了一定的保護作用,但密封效果一般,關蓋與開蓋過程繁瑣、高溫讓蓋子變形等情況,會直接造成漏液、氣溶膠污染等問題,想想就令人頭大......為了盡可能規避以上問題出現,不讓 PCR/qPCR ?實驗付之東流,在使用 PCR 板時,自粘膜逐漸成為實驗優選。但不同來源的自粘膜的品質參差不齊,密封不嚴,透光性不佳,不能適用于小通量也是使用 PCR/qPCR ?膜的制約之處。
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qPCR 高透膜:用于 PCR 板或者酶標板,幾乎適合所有板型。
高度透明并具有極小的自體熒光,適用于 qPCR、ELISA 等熒光或顯色分析實
壓力敏感型膜,只有在施加壓力時才具有粘性,因此封閉時反應孔上方的膜粘性很小,可有效減少樣品黏附(原理見下圖)

壓力敏感型膜的原理

BRAND 壓敏型高透膜
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普通 PCR 膜
用于 PCR 板或者酶標板,幾乎適合所有板型。
透光,適合肉眼或者光學觀察,適用于 PCR、ELISA、EIA 等顯色分析實驗。
邊條便于拿取,強粘性保證密封效果。
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?PCR/儲存膜
用于 PCR、ELISA 或樣品儲存。適合 -80 ℃ 樣品冷藏,
耐受 DMSO 與溶透明可用于顯色分析實驗或肉眼觀察。可撕開重復使用

能夠封住 PCR 板的膜千篇一律,真正耐高溫、蒸發少、透光好的膜萬里挑一。
實驗表明,BRAND 壓力敏感型高透膜可以更有效地密封 PCR 板,減少蒸發(見下圖)。
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使用 BRAND 壓敏型高透膜與不同 PCR 自粘膜 25 個循環后的蒸發率比較實驗,
PCR 板為 BRAND。實驗顯示 BRAND 壓敏型高透膜可顯著減少 PCR 反應體系的蒸發。
想要 PCR 實驗不踩「坑」,選對膜很重要,溫馨提示:有了膜可別忘了封膜神器哦!

BRAND? 封膜用刮板
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正所謂:
古今 P-C-R,
貼膜鎖乾坤,
多少實驗事,
都付笑談中…
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