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大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）酶聯(lián)免疫檢測

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使用前仔細(xì)閱讀本說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理，來檢測大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX），只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

用????途：用于大鼠血清、尿液及相關(guān)液體樣本中Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）測定。

工作原理

本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定樣品中大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）水平。向預(yù)先包被了大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX），溫育；溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）的濃度呈正相關(guān)。

試劑盒組成?

需要而未提供的試劑和器材

1．?37℃恒溫箱。

2．?標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

3．?精密移液器及一次性吸頭

4．?蒸餾水，

5．?一次性試管

6．?吸水紙

注意事項

1．?從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．?各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差

3．?嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

4．?為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。

5．?不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

6．?底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板：如果有自動洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中

標(biāo)本要求?

1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

操作程序

1.?標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。)