在SARS-COV-2危機期間,世界各地的醫(yī)學(xué)研究人員都正在開發(fā) SARS-COV-2 檢測方法,以跟蹤人群中的病毒暴露和可能的免疫力 (1,2,3)。檢測策略包括采用 PCR 診斷陽性感染(通過檢測存在病毒遺傳物質(zhì)的情況)和使用血液檢測試劑盒(也稱為血清學(xué)檢測)。使用這些診斷工具,科學(xué)界可以更好地了解 SARS-COV-2 流行病的規(guī)模和軌跡。
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但是,來自牛津的醫(yī)學(xué)教授 John Bell 表示,包括英國和西班牙在內(nèi)的國際研究界的科學(xué)家認(rèn)為,許多用于評估的血清學(xué)抗體檢測試劑盒“性能不佳”。貝爾進一步指出,假陰性和/或假陽性太多,導(dǎo)致反映病毒暴露和可能的免疫力的流行病學(xué)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確(1)。美國國家科學(xué)院新發(fā)傳染病常設(shè)委員會(the National Academy of Sciences’ Standing Committee on Emerging Infectious Diseases)和 21 世紀(jì)健康威脅(21st Century Health threats )成員對特定抗體血清學(xué)檢測的可靠性和可獲得性上表示關(guān)注 (4)。在寫給白宮的信中,美國國家科學(xué)院科學(xué)家指出,“在進行嚴(yán)格的質(zhì)控及描述其性能特征后之前",對當(dāng)前的抗體檢測結(jié)果”應(yīng)懷有可疑的態(tài)度” (4)。
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科學(xué)界正緊鑼密鼓地開發(fā)SARS-COV-2的診斷和治療方法,所以對于抗體供應(yīng)商而言,對檢測試劑進行充分的特征描述和嚴(yán)格的驗證以能夠提供高度一致性、可重復(fù)的結(jié)果比以往任何時候都更為重要。Cell Signaling Technology (CST) 提供關(guān)鍵試劑(包括專門用于 SARS-CoV-2 組合的試劑)、試劑盒和服務(wù),以支持全世界的傳染病研究人員了解病毒的行為、如何阻斷病毒以及如何治愈它。CST 的研究人員積極參與科學(xué)合作,了解 SARS-CoV-2 的作用機制,提供深刻的見解,了解將在未來疫苗開發(fā)中使用的病毒的分子結(jié)構(gòu)。
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SARS-CoV-2 研究緊迫、至關(guān)重要,我們沒有時間浪費在產(chǎn)生模棱兩可結(jié)果的試劑上,更沒有時間浪費在由于特異性差而失敗的實驗上。為確保質(zhì)量、特異性和一致性,CST 遵循抗體驗證標(biāo)志?(改編自 Uhlen, M., Bandrowski, A., Carr, S. et al. A proposal for validation of antibodies. Nat Methods 13, 823–827 (2016))。
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每種 CST 開發(fā)的抗體均經(jīng)歷苛刻的相關(guān)應(yīng)用的內(nèi)部驗證檢測,這些檢測會根據(jù)靶標(biāo)和各個抗體的進行匹配。CST 向來是生產(chǎn)(我們內(nèi)部生產(chǎn)超過 95% 的商品化產(chǎn)品)并在內(nèi)部嚴(yán)格驗證我們的產(chǎn)品。因為沒有任何一個單獨的測定方法可以確定驗證的有效性,所以抗體驗證檢測可以是以下各項的組合:
1) 二元模型:分析一組陽性和陰性表達的細(xì)胞系,野生型與遺傳或基于 CRISPR 的敲除
2) 范圍表達:分析大量具有已知靶標(biāo)表達水平(高表達與低表達因子)、siRNA 和雜合敲除的細(xì)胞系
3) 正交數(shù)據(jù):通過基于非抗體的分析(包括質(zhì)譜法)進行驗證
4) 多種抗體:使用基于富集的應(yīng)用(IP、ChIP、ChIP-seq)來觀察不同的抗體結(jié)合相同靶標(biāo)的信號強弱并進行比較,或使用免疫染色應(yīng)用以來證明相同的染色分布或靶標(biāo)定位
5) 異源表達:天然(或突變)靶蛋白異源表達后,在細(xì)胞系中評估
6) 補充測定:使用競爭性 ELISA、肽點印跡、蛋白質(zhì)陣列來確認(rèn)信號特異性或用抗原肽封閉以消除修飾特異性
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另外,CST 提供了大量的針對此次病毒研究的重組單克隆抗體小包裝套裝(見下表)。這些產(chǎn)品可以保證批次高度一致性,且持續(xù)供應(yīng)科學(xué)家。
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病毒入侵,復(fù)制和轉(zhuǎn)錄
· Endosomal Marker Antibody Sampler Kit:
Caveolin-1,Clathrin Heavy Chain,EEA1,Rab5A,Rab7,Rab11
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· ER and Golgi-Associated Marker Proteins Antibody Sampler Kit:
Calnexin,ERp72,PDI,RCAS1,Syntaxin 6
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· Organelle Localization IF Antibody Sampler Kit:
AIF,EEA1,LAMP1,PDI,RCAS1
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· Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit:
eIF4A,eIF4A1,Phospho-eIF4B,eIF4B,Phospho-eIF4E,eIF4E,Phospho-eIF4G,eIF4G,eIF4H
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· Vesicle Trafficking Antibody Sampler Kit:
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Phospho-Caveolin-1,Caveolin-1,Clathrin Heavy Chain,APPL1,EEA1,Syntaxin 6,Rab5A,GOPC
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病毒檢測和天然免疫激活
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?Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit:
MDA-5,Rig-I,MAVS,IRF-3,TBK1/NAK,Phospho-TBK1/NAK,Phospho-IRF-3,Phospho-IKKε,IKKε
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?Toll-like Receptor Antibody Sampler Kit:
Toll-like Receptor 1,Toll-like Receptor 2,Toll-like Receptor 7,Toll-like Receptor 9
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?Toll-like Receptor Antibody Sampler Kit II:
Toll-like Receptor 1,Toll-like Receptor 2,Toll-like Receptor 3,Toll-like Receptor 6,Toll-like Receptor 7,Toll-like Receptor 8,Toll-like Receptor 9
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I 型干擾素和病毒限制因子
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Jak1,Jak2
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?Phospho-Jak Family Antibody Sampler Kit:
Jak1,Phospho-Jak1,Jak2,Phospho-Jak2,Jak3 ,Phospho-Jak3,Tyk2,Phospho-Tyk2
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?Stat Antibody Sampler Kit II:
Stat1,Stat2,Stat3,Stat4,Stat5,Stat6
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? Phospho-Stat Antibody Sampler Kit:
Phospho-Stat1,Phospho-Stat2,Phospho-Stat3,Phospho-Stat3,Phospho-Stat5,Phospho-Stat6
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細(xì)胞因子與炎癥
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· Jak/Stat Pathway Inhibitors Antibody Sampler Kit:
SOCS1, SOCS2, SOCS3, PIAS1, PIAS3, PIAS4
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Jak1,Jak2
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· Phospho-Jak Family Antibody Sampler Kit
Jak1,Phospho-Jak1,Jak2,Phospho-Jak2,Jak3 ,Phospho-Jak3,Tyk2,Phospho-Tyk2
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Stat1,Stat3,Stat5,Stat6
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· STAT Antibody Sampler Kit II:
Stat1,Stat2,Stat3,Stat4,Stat5,Stat6
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· Phospho-Stat Antibody Sampler Kit:
Phospho-Stat1,Phospho-Stat2,Phospho-Stat3,Phospho-Stat3,Phospho-Stat5,Phospho-Stat6
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細(xì)胞死亡與生存力
? Annexin V Early Apoptosis Detection Kits
? Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (II)
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