產品介紹：

Frdbio® 小鼠抗體純化試劑盒用于純化小鼠血清,腹水和含有鼠源抗體的制品;本試劑盒配備了純化小鼠抗體所必需預裝柱及核心試劑。

本試劑盒中預裝柱的填料為Protein G Beads 4FF。主要優勢如下：

本蛋白純化試劑特點：

Ø  Protein G Beads 4FF可以耐高壓,可以在高速流速狀態下純化；

Ø  洗脫條件溫和，不會對抗體造成損傷；

Ø  填料再生簡單，反復使用，實驗室測試表明再生15次后，Protein G Beads 4FF填料效率沒有明顯降低。

產品主要參數：

基質：交聯度4%瓊脂糖凝膠

配體：重組蛋白G

載量：>30 mg Mouse lgG /ml 介質

介質微球粒徑：45-165um

最大流速：300cm/h

試劑盒已經提供材料：

其他需要自備試劑材料：

²  待純化抗體樣品；

²  移液器及吸頭；

²  去離子水；

²  0.22μm或0.45μm濾膜過濾。

產品儲存

儲存緩沖液：含20%乙醇的1×PBS

儲存溫度：2-8℃

產品使用操作：

1.使用前準備

1）緩沖液的準備

基礎緩沖液:

按照實驗所用量，取試劑盒中濃縮基礎緩沖液，加入9倍體積的去離子水稀釋成基礎緩沖液；

洗脫液:

a.試劑盒提供的洗脫干粉用10ml無菌去離子水溶解并混勻，即為10X 洗脫液溶液。配制好的10X 洗脫溶液-20ºC保存，至少一年有效。

b.洗脫緩沖液的配制：a步驟配好的10X洗脫液, 加入9倍體積的去離子水稀釋成洗脫緩沖液。配制好的洗脫緩沖液4ºC保存，兩周內有效；

緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過濾。

2）樣品準備樣品

使用上述基礎緩沖液制備上樣樣品（細胞/細菌裂解液），樣品在上樣前用0.22μm或0.45μm濾膜過濾，防止堵塞柱子。

3）Frdbio® Protein G Beads 4FF純化柱的準備

取出試劑盒中預裝柱平衡到室溫，打開純化柱底部開關，用3-5個體積去離子水沖洗柱床，隨后用5-10個柱床體積基礎緩沖液平衡柱子，確保柱床無氣泡。

2.從樣品中純化目標蛋白

1）使用蠕動泵上樣或者直接上樣（重力法）；

上樣量不要超過柱子的結合能力。

2）上樣完畢后，用基礎緩沖液洗掉未結合的雜蛋白，直到到紫外吸收監測儀達到一個穩定的基線（一般需要10-15個柱體積）；

3）使用洗脫液洗脫目的抗體，順次接收并做好標記，直到到紫外吸收監測儀達到一個穩定的基線（一般需要5-10個柱體積）；

4）SDS-PAGE檢測分析得到的純化樣品（包括流穿組分、洗雜組分和洗脫組分）以及原始樣品,純化樣品根據后續實驗進行透析濃縮等。

3.純化柱清洗、再生與保存。

1）5-10倍柱床體積的洗脫緩沖液繼續清洗；

2）3倍柱床體積的去離子水清洗；

3）5-10倍柱床體積的0.1M NaOH溶液；

4）3倍柱床體積去離子水清洗后于含20%乙醇的PBS 2-8℃保存。

僅供科研實驗使用