??? 相對定量 (mRNA表達量分析)：基因表達的研究一般采用相對定量的方法。相對定量法必須對樣品的目的基因和內參基因同時分別進行定量，然后求出對于內參基因的目的基因的相對量。通過對樣品間的目的基因的相對量進行比較，可以對不同樣品間的mRNA進行表達量分析。內參基因通常選用表達量相對恒定的Housekeeping Gene，如：GAPDH、β-actin等。通過同時對內參基因的實時檢測，可以對樣品之間由于起始細胞數不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA量誤差進行校正，達到在嚴格意義上對樣品之間的mRNA表達量進行分析之目的。
　　PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，隨著擴增循環數的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累，因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。