Frdbio®藻紅蛋白抗體快速標(biāo)記試劑盒-試劑盒-抗體-生物在線

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福因德科技(武漢)有限公司
Frdbio®藻紅蛋白抗體快速標(biāo)記試劑盒

Frdbio®藻紅蛋白抗體快速標(biāo)記試劑盒

商家詢價(jià)

產(chǎn)品名稱: Frdbio®藻紅蛋白抗體快速標(biāo)記試劑盒

英文名稱: Frdbio®R-phycoerythrin antibody quick labeling Kit

產(chǎn)品編號(hào): ARL0022K-1

產(chǎn)品價(jià)格: null

產(chǎn)品產(chǎn)地: 中國(guó)

品牌商標(biāo): Frdbio

更新時(shí)間: 2023-08-15T17:03:56

使用范圍:

福因德科技(武漢)有限公司
  • 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
  • 地址 : 光谷國(guó)際B座1513
  • 郵編 :
  • 所在區(qū)域 : 湖北省
  • 電話 : 158****4543 點(diǎn)擊查看
  • 傳真 : 點(diǎn)擊查看
  • 郵箱 : 2633787800@qq.com
  • 二維碼 : 點(diǎn)擊查看

產(chǎn)品介紹:

藻紅蛋白(R-phycoerythrin ,R-PE)是從紅藻中分離提純的一種熒光蛋白,最大激發(fā)波長(zhǎng)為565nm,最大熒光發(fā)射峰為575nm。由于其吸光度和熒光量產(chǎn)率很高,熒光強(qiáng)而穩(wěn)定,靈敏度高備受免疫檢測(cè)標(biāo)記領(lǐng)域青睞。R-PE蛋白的亞基組成為(αβ)6γ,每個(gè)α、β亞基分子量為20KDa,每個(gè)γ亞基分子量為30KDa,總分子量為240kDa。目前還沒(méi)有辦法通過(guò)重組蛋白表達(dá)量產(chǎn),只能從紅藻中提取,因此其生產(chǎn)成本制約其廣泛使用。



基本原理:

本試劑盒利用抗體和R-PE上游離的氨基,采用定向?qū)优悸?lián)技術(shù)將抗體分子與R-PE共價(jià)偶聯(lián),本試劑盒采用加長(zhǎng)臂方案,使被標(biāo)記抗體與熒光蛋白之間有一定長(zhǎng)度柔性連接臂,避免由于位阻妨礙抗體活性或者熒光蛋白發(fā)光效率。

主要特點(diǎn):

ü??試劑盒組分齊全,操作簡(jiǎn)單,只要按照操作步驟進(jìn)行便可得到高品質(zhì)R-PE標(biāo)記抗體;

ü??本試劑盒所配置的R-PE為高純度,高活性熒光蛋白,熒光發(fā)光效率更高;

ü??本試劑采用定向偶聯(lián)技術(shù),熒光蛋白和抗體都不會(huì)發(fā)生自連,保證偶聯(lián)物的特異性和均一性;

ü??試劑盒所使用的交聯(lián)劑增加了延長(zhǎng)臂,確保不會(huì)因?yàn)榈鞍踪|(zhì)位阻而影響發(fā)光效率;

ü??鑒于R-PE的蛋白骨架特性,其抗淬滅能力更強(qiáng)。

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試劑盒已經(jīng)提供材料:

ü??活化R-PE蛋白? ? 1mg? 可用于標(biāo)記0.3-0.5mg抗體

ü??標(biāo)記緩沖液? ? ?30ml

ü??抗體修飾試劑? ? 30ul*1支

ü??30KMWCO超濾管? ?2支

ü??封閉試劑? ? ? 1支(臨用前加DMSO 5ul)

ü??DMSO溶劑? ? ? 200ul*1支

ü??說(shuō)明書(shū)? ? ? ?1份

其他需要自備試劑材料:

2??待標(biāo)記的生物分子;

2??移液器及吸頭;

2??去離子水。

試劑盒儲(chǔ)存

試劑盒中抗體修飾試劑封閉試劑放在-20?C,其余組分放在2-8可保存6個(gè)月以上。

試劑盒操作流程:

1.抗體的修飾

1)取待標(biāo)記抗體(純度>90%),用標(biāo)記緩沖液調(diào)整濃度到 5mg/ml左右為宜,按照每mg抗體加入2μl?抗體修飾試劑,輕輕混勻,在室溫下避光晃動(dòng)反應(yīng) 90分鐘;

2)反應(yīng)完畢后,將其轉(zhuǎn)入30KMWCO超濾管,用標(biāo)記緩沖液超濾3次(每次管芯殘留液體不超過(guò)原始液量1/4),得到修飾抗體

2.活化R-PE蛋白與抗體偶聯(lián)

1)用標(biāo)記緩沖液復(fù)溶活化R-PE蛋白,濃度調(diào)整為5mg/ml

2)將修飾抗體活化R-PE蛋白,按照質(zhì)量比1:3比例(每mg修飾抗體對(duì)應(yīng)3mg活化R-PE蛋白)混合,室溫避光反應(yīng)2小時(shí);

3)將封閉試劑管中加入5ul DMSO,;按照每0.5mg抗體5ul比例用量加入步驟2)反應(yīng)產(chǎn)物中,封閉未反應(yīng)完的活性基團(tuán);

4)標(biāo)記好的抗體分裝,加入適當(dāng)保護(hù)劑,-20保存?zhèn)溆谩?/span>



注意事項(xiàng):

1)本試劑盒中抗體修飾試劑封閉試劑為高活性試劑,請(qǐng)-20保存;其余成份2-8℃保存、勿凍存。

2)試劑盒組份在運(yùn)輸過(guò)程中可能造成顛倒,會(huì)使液體或干粉試劑粘到管壁或瓶蓋上。使用前請(qǐng)離心處理,以使附著管壁或瓶蓋的液體或干粉試劑沉積到管底。

3)本試劑盒中活化R-PE蛋白需要避光低溫保存,一旦復(fù)溶請(qǐng)一次性使用完;標(biāo)記過(guò)程盡量保證其避光;

4)封閉劑需現(xiàn)用現(xiàn)配,干粉溶解后不能長(zhǎng)期保存;

5)使用本試劑盒標(biāo)記抗體,其抗體特異性要高,純度不低于90%,最好使用單克隆抗體,溶液環(huán)境不含游離氨基,最好為PBS溶液;標(biāo)記前抗體需去除NaN3和BSA,抗體的透析、濃縮和濃度測(cè)定等操作都會(huì)造成抗體量的損失,因此標(biāo)記前準(zhǔn)備抗體時(shí)需根據(jù)具體情況考慮最適的抗體量;

6)由于抗體修飾后所帶的基團(tuán)容易被重新氧化,因此修飾后抗體需盡快與活化的R-PE進(jìn)行偶聯(lián);

7)本試劑盒中的超濾管為特殊處理的,可有效避免熒光淬滅和蛋白吸附損失,市面超濾管可能會(huì)對(duì)標(biāo)記效率造成影響。

8)本試劑盒中部分試劑為高活性試劑,對(duì)皮膚和身體有一定的危害,請(qǐng)全程戴手套操作;DMSO屬微毒類,對(duì)人體皮膚有滲透性,對(duì)眼有刺激作用,使用時(shí)避免與皮膚、眼睛和粘膜接觸。