MALDI-TOF 分子量
產(chǎn)品名稱(chēng)： MALDI-TOF 分子量
英文名稱(chēng)： MALDI-TOF 分子量
產(chǎn)品編號(hào)：
產(chǎn)品價(jià)格： 詢(xún)價(jià)
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： null
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?——即蛋白質(zhì)（多肽）分子量的分析技術(shù)服務(wù)
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基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI）其基本原理為用激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而電離過(guò)程中將質(zhì)子轉(zhuǎn)移到生物分子，而使生物分子電離的過(guò)程。
它是一種軟電離技術(shù)，適用于混合物及生物大分子的測(cè)定。MALDI-TOF-MS具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高及分辨率高等特點(diǎn)，為生命科學(xué)等領(lǐng)域提供一種強(qiáng)有力的分析測(cè)試手段，并正扮演著越來(lái)越重要的作用。
“MALDI-TOF分子量分析，是蛋白質(zhì)藥物樣品理化分析的起點(diǎn)之一”
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技術(shù)指標(biāo)
●? 樣品要求：
含鹽量：揮發(fā)性無(wú)機(jī)鹽<20mM，不揮發(fā)性無(wú)機(jī)鹽<5mM；
樣品蛋白質(zhì)總含量>50pmol，純度>90%；
樣品應(yīng)盡量保持其純度，不要添加任何保護(hù)劑或其它物質(zhì)。
●? 4800 MALDI-TOF/TOF技術(shù)特性：
激光器：ND : YAG，波長(zhǎng)355nm，頻率200HZ；
檢測(cè)模式：正離子和負(fù)離子模式；
離子飛行管：線性（Linear）模式=3750px，反射（Reflector）模式=7500px。
●? 多肽蛋白質(zhì)樣品分析：
多肽樣品測(cè)試分辨率可以達(dá)到18000以上，小蛋白質(zhì)樣品測(cè)試分辨率可以達(dá)到10000以上，大蛋白質(zhì)樣品測(cè)試分辨率可以達(dá)到5000以上。
案例分析
蛋白質(zhì)類(lèi)質(zhì)譜分子量測(cè)定
(1)?樣品信息：抗體樣品，理論分子量為140,000Da
結(jié)果圖譜：
抗體類(lèi)蛋白質(zhì)樣品的MALDI-TOF分子量測(cè)定圖譜
(2) 樣品信息：PEG修飾樣品，理論分子量為4300Da
結(jié)果圖譜：
Q&A
1)?????蛋白質(zhì)類(lèi)藥物進(jìn)行MALDI-TOF分析時(shí)會(huì)用到不同的基質(zhì)。
? ? ? ? ?■ 根據(jù)蛋白質(zhì)樣品分子量大小不同選擇不同的基質(zhì)：
? ? ? ? ?■?Mr<10KDa，α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid (CHCA)；
? ? ? ? ?■?Mr>10KDa，Sinapinic Acid (SA)；
? ? ? ? ?■?部分糖蛋白質(zhì)樣品測(cè)試選擇基質(zhì)為：Super DHB。
2)?????比較MALDI-TOF和LC-MS（Deconvolution）測(cè)定分子量的方法。
? ? ? ? ?■?MALDI-TOF測(cè)定蛋白質(zhì)樣品分子量較為簡(jiǎn)便快捷、通量高，且測(cè)試結(jié)果為單電荷無(wú)需再進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，但對(duì)于大分子量蛋白質(zhì)樣品，只能獲取樣品平均分子量。LC-MS測(cè)定分子量較為繁瑣復(fù)雜、通量較低，且測(cè)試結(jié)果為多電荷，一般需去卷積處理，對(duì)于大蛋白可獲取較準(zhǔn)確分子量信息。