?——即蛋白質（多肽）分子量的分析技術服務

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基質輔助激光解吸飛行時間質譜（MALDI）其基本原理為用激光照射樣品與基質形成的共結晶薄膜，基質從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而電離過程中將質子轉移到生物分子，而使生物分子電離的過程。它是一種軟電離技術，適用于混合物及生物大分子的測定。MALDI-TOF-MS具有靈敏度高、準確度高及分辨率高等特點，為生命科學等領域提供一種強有力的分析測試手段，并正扮演著越來越重要的作用。

“MALDI-TOF分子量分析，是蛋白質藥物樣品理化分析的起點之一”

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技術指標

●? 樣品要求：

含鹽量：揮發性無機鹽<20mM，不揮發性無機鹽<5mM；

樣品蛋白質總含量>50pmol，純度>90%；

樣品應盡量保持其純度，不要添加任何保護劑或其它物質。

●? 4800 MALDI-TOF/TOF技術特性：

激光器：ND : YAG，波長355nm，頻率200HZ；

檢測模式：正離子和負離子模式；

離子飛行管：線性（Linear）模式=3750px，反射（Reflector）模式=7500px。

●? 多肽蛋白質樣品分析：

多肽樣品測試分辨率可以達到18000以上，小蛋白質樣品測試分辨率可以達到10000以上，大蛋白質樣品測試分辨率可以達到5000以上。

案例分析

蛋白質類質譜分子量測定

(1)?樣品信息：抗體樣品，理論分子量為140,000Da

結果圖譜：

抗體類蛋白質樣品的MALDI-TOF分子量測定圖譜

(2) 樣品信息：PEG修飾樣品，理論分子量為4300Da

結果圖譜：

Q&A

1)?????蛋白質類藥物進行MALDI-TOF分析時會用到不同的基質。

? ? ? ? ?■ 根據蛋白質樣品分子量大小不同選擇不同的基質：

? ? ? ? ?■?Mr<10KDa，α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid (CHCA)；

? ? ? ? ?■?Mr>10KDa，Sinapinic Acid (SA)；

? ? ? ? ?■?部分糖蛋白質樣品測試選擇基質為：Super DHB。

2)?????比較MALDI-TOF和LC-MS（Deconvolution）測定分子量的方法。

? ? ? ? ?■?MALDI-TOF測定蛋白質樣品分子量較為簡便快捷、通量高，且測試結果為單電荷無需再進行數據處理，但對于大分子量蛋白質樣品，只能獲取樣品平均分子量。LC-MS測定分子量較為繁瑣復雜、通量較低，且測試結果為多電荷，一般需去卷積處理，對于大蛋白可獲取較準確分子量信息。