JM110感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.產品簡介：

本產品是采用大腸桿菌JM110菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，甲基化基因dam,dcm缺失菌株，只適用于質粒的轉化，一般不用于質粒構建。

基因型：rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F’[traD36 proAB lacIqlacZΔM15]

特點：1．JM110 菌株具有硫酸鏈霉素抗性(StrR)；是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，提取得到的質粒DNA，可被對dam、dcm甲基化敏感的內切酶切割。2．lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以進行藍白斑篩選，但轉化效率不高。一般不用于質粒構建，只適用于質粒轉化。pUC19質粒檢測，轉化效率可達107 cfu/μgDNA。

2.使用說明：

1．取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。

3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。

4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。

5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養， 37℃培養12~16h。

3.注意事項：

1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。

2．整個動作要輕柔。

*本試劑僅供實驗室研究使用