ClearVTM細胞周期與凋亡檢測試劑盒
產品名稱： ClearVTM細胞周期與凋亡檢測試劑盒
英文名稱： ClearVTM Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit
產品編號： C331408
產品價格： 298
產品產地： 美國
品牌商標： Arcegen
更新時間： 2025-10-20T09:25:48
使用范圍： null
| 規格 | 價格 |
| 50T | 298.0 |
| 100T | 528.0 |
- 聯系人 : 孟醒
- 地址 : 申江南路4388號1幢2層208室
- 郵編 : 201314
- 所在區域 : 上海
- 電話 : 189****7703 點擊查看
- 傳真 : 點擊查看
- 郵箱 : cmeng@magibagbio.com
產品簡介
本產品采用了經典的碘化丙啶染色（Propidium staining ，即 PI staining）方法對細胞周期與細胞凋亡進行分 析。碘化丙啶（Propidium，PI）是一種雙鏈 DNA 熒光染料 ，其嵌入雙鏈 DNA 后可以產生熒光 ，并且熒光 強度和雙鏈 DNA 的含量成正比。
細胞內的 DNA 被 PI 染色后 ，可以用流式細胞儀對細胞進行 DNA 含量測定。假設 G0/G1 期細胞的熒光強 度為 1 ，那么含有雙份基因組 DNA 的 G2/M 期細胞的熒光強度的理論值為 2 ，正在進行 DNA 復制的 S 期 細胞的熒光強度為 1-2 之間。凋亡細胞由于細胞核發生濃縮以及發生 DNA 片段化（DNA fragmentation）導 致部分基因組 DNA 片斷在染色過程中丟失 ，因此凋亡細胞 PI 染色后呈現弱染 ，熒光強度小于 1 ，在流式 熒光圖上出現 sub-G1 峰 ，即凋亡細胞峰。
細胞凋亡也可以用流式細胞儀觀察細胞光散射的變化來檢測。細胞發生凋亡時 ，由于胞漿和染色質濃縮、 核碎裂 ，產生凋亡小體 ，使細胞的光散射性質發生變化。凋亡前期 ，染色質皺縮 ，細胞密度增加 ，前向角 光散射色顯著降低。凋亡后期 ，細胞產生凋亡小體 ，前向角光散射和側向角光散色都顯著降低。
本試劑盒通常應用于貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測。如果用于組織的細胞周期與細胞凋亡檢 測 ，則必須把組織消化成單細胞狀態 ，才可以進行檢測。
產品規格
|
產品貨號 |
C331408E |
C331408S |
|
產品規格 |
50 T |
100T |
組分信息
|
組分編號 |
組分名稱 |
C331408E |
C331408S |
|
C331408-A |
RNase A |
0.5 mL |
1 mL |
|
C331408-B |
PI Solution |
0.5 mL |
1 mL |
|
C331408-C |
Staining Solution |
25 mL |
25 mL*2 |
產品儲存
冰袋（wet ice）運輸。-20°C 避光保存 ，有效期為 2 年。
【注】 ：如果需要在短時間內多次重復使用 ，可以于 4℃避光保存 ，2 個月內有效。
操作注意
1. 本試劑盒需要使用流式細胞儀進行檢測。
2. 細胞處理需輕柔 ，盡量避免人為的損傷細胞。
3. 為防止不同批次細胞在實驗時所處周期不同導致重復性差 ，可以在實驗前進行細胞的同步化處理。實驗 細胞應處于對數生長期 ，貼壁細胞一般在 50～80%匯合度時收集為宜。
4. 400 目篩網過濾是用來將粘在一起的細胞團濾掉 ，留下單細胞 ，否則會出現人為的多倍體干擾。如果沒 有條件過濾 ，請在染色之前將細胞輕彈以分散 ，再進行染色。
5. 熒光染料均存在淬滅問題 ，保存和使用過程中請盡量注意避光 ，以減緩熒光淬滅。
6. 操作碘化丙啶時 ，應注意防護 ，保護眼睛、避免吸入。
7. 為了您的安全和健康 ，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
8. 本產品僅作科研用途！
操作說明
1. 樣品制備：
細胞數量控制在 1×105~ 1 × 106 個。
a）貼壁細胞：小心吸除細胞培養液，用胰酶消化細胞，制備成單細胞懸液。1000 g 離心 5 min，沉淀細胞， 棄上清 ，用 1 mL 預冷的 PBS 潤洗細胞一次 ，離心收集細胞。
b）懸浮細胞： 1000 g 離心 5 min ，沉淀細胞 ，小心吸除上清。加入 1 mL 預冷的 PBS ，重懸細胞 ，再次離 心收集細胞。
c）組織細胞：將組織塊用剪刀剪成盡量小的小塊后 ，用 0.25%的胰酶消化 0.5-1 h ，經過 200-400 目篩網過 濾得到單細胞懸液。1000 g 離心 5 min，沉淀細胞。加入約 1 mL 預冷的 PBS ，重懸細胞 ，再次離心沉淀細 胞。如組織難以消化 ，可加入適量膠原酶。
2. 細胞固定
細胞沉淀用 1 mL 預冷的 70%乙醇輕輕混勻 ，4℃固定 2 h 以上或者過夜。接下來 1000 g ，離心 5 min 沉淀 細胞后 ，用 1 mL 預冷的 PBS 重懸。然后再次 1000 g 離心 5 min 沉淀細胞。
3. 染色
在 0.5 mL Staning Solution（C331408-C）中加入 10 μL PI Solution（C331408-B）和 10 μL RNase A（C331408-A） 溶液，混勻待用。每個細胞樣品加入 0.5 mL 配置好的碘化丙啶染色液，輕輕混勻重懸細胞。37℃避光孵育 30 min，就可以進行流式檢測 ，流式檢測最好在 5 h 內完成。
【注】 ：配置好的 PI 染色液在短時間內可以 4℃保存 ，宜當日使用。
4. 流式檢測和分析
細胞用 400 目篩網過濾 ，用流式細胞儀進行檢測 ，在激發波長 488 nm 波長處檢測 ，同時檢測光散射情況。 采用適當分析軟件進行細胞 DNA 含量分析和光散射分析。