堿性磷酸酶-抗體快速標(biāo)記試劑盒
產(chǎn)品名稱： 堿性磷酸酶-抗體快速標(biāo)記試劑盒
英文名稱： 堿性磷酸酶-抗體快速標(biāo)記試劑盒
產(chǎn)品編號： ARL0600k-1
產(chǎn)品價格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 中國
品牌商標(biāo)： Frdbio
更新時間： 2025-12-19T14:57:30
使用范圍： null
| 規(guī)格 | 價格 |
| 20*3 | 3880.0 |
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
- 地址 : 光谷國際B座1513
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 湖北省
- 電話 : 158****4543 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : 2633787800@qq.com
- 二維碼 : 點(diǎn)擊查看
產(chǎn)品介紹：
堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase ,以下簡稱AP)分子量140,000Da,在分子生物學(xué)和蛋白質(zhì)研究中的主要應(yīng)用是從DNA中去除5-磷酸基團(tuán)或作為免疫分析（如ELISA）的報告系統(tǒng)。在免疫分析測試中，酶通常與特定的一級或二級抗體結(jié)合，其活性用顯色（或發(fā)光）底物檢測。
本試劑盒可以幫助實(shí)驗(yàn)者快速實(shí)現(xiàn)AP與抗體的偶聯(lián)。
基本原理：
本試劑盒利用抗體和AP上游離的伯氨基（-NH2），采用定向?qū)优悸?lián)技術(shù)將抗體分子與AP共價偶聯(lián)，主要特點(diǎn)：
ü 試劑盒組分齊全，操作簡單，只要按照操作步驟進(jìn)行便可得到高品質(zhì)AP偶聯(lián)抗體；
ü 本試劑盒所配置的AP為高純度，高活性，效率更高；
ü 本試劑采用定向偶聯(lián)技術(shù)，AP和抗體都不會發(fā)生自連，保證偶聯(lián)物的特異性和均一性；
ü 試劑盒所使用的交聯(lián)劑增加了延長臂，確保不會因?yàn)榈鞍踪|(zhì)位阻而影響AP酶效率；
試劑盒已經(jīng)提供材料：
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20X3T |
200X1T |
200X3T |
2000X1T |
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可標(biāo)抗體量 |
30∽60ug |
100∽200ug |
300∽600ug |
1∽2mg |
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最多可標(biāo)抗體數(shù) |
3 |
1 |
3 |
1 |
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組分名稱 |
各組分配置數(shù)量 |
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活化AP凍干粉 |
20ugX3 |
200ug |
200ugX3 |
2mg |
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標(biāo)記緩沖液 |
30ml |
30ml |
30ml |
30ml |
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抗體修飾試劑 |
30ul*1 |
30ul*1 |
30ul*1 |
30ul*1 |
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30KMWCO超濾管 |
3支 |
1支 |
3支 |
1支 |
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封閉試劑 |
50ug*3支 |
50ug*1支 |
50ug*3支 |
50ug*1支 |
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DMSO溶劑 |
200ul |
200ul |
200ul |
200ul |
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說明書 |
1份 |
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其他需要自備試劑材料：
2 待標(biāo)記的生物分子；
2 移液器及吸頭；
2 去離子水。
試劑盒儲存
試劑盒抗體修飾試劑放在-20?C，其余組分放在2-8℃可保存6個月以上。
試劑盒操作流程：
1.抗體的修飾
1）取待標(biāo)記抗體（純度>90%），濃度調(diào)整到 5mg/ml左右為宜，按照每毫克抗體加入2μl 抗體修飾試劑溶液，輕輕混勻，在室溫下避光攪拌反應(yīng) 90分鐘；
2）反應(yīng)完畢后，將其轉(zhuǎn)入30KMWCO超濾管，用標(biāo)記緩沖液超濾3-5次（每次12000rpm 5min），每次管芯內(nèi)液體體積不超過原體積1/4為宜，最后一次超濾完成，管芯內(nèi)液體即為修飾的抗體。
2.活化AP與抗體偶聯(lián)
1）用標(biāo)記緩沖液復(fù)溶活化AP凍干粉，得到活化AP溶液，濃度調(diào)整為5mg/ml（按1mg活化AP凍干粉加入200ul標(biāo)記緩沖液復(fù)溶）；
2）將修飾抗體與活化AP溶液，按照質(zhì)量比1:2.5比例（每mg修飾抗體對應(yīng)2.5mg活化AP溶液）混合，室溫避光反應(yīng)2小時；
3）將封閉試劑管中加入5ulDMSO,配置成10mg/ml封閉試劑溶液；按照每0.5mg抗體5ul的體積比例加入上述步驟2）反應(yīng)產(chǎn)物中，封閉未反應(yīng)完的活性基團(tuán)；
4）標(biāo)記好的抗體分裝，加入適當(dāng)保護(hù)劑，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
注意事項(xiàng)：
1） 本試劑盒中抗體修飾試劑和封閉試劑為高活性試劑，請-20℃保存；其余成份2-8℃保存、勿凍存。
2）試劑盒組份在運(yùn)輸過程中可能造成顛倒，會使液體或干粉試劑粘到管壁或瓶蓋上。使用前請離心處理，以使附著管壁或瓶蓋的液體或干粉試劑沉積到管底。
3） 本試劑盒中活化AP凍干粉需要避光低溫保存，一旦復(fù)溶請一次性使用完；標(biāo)記過程盡量保證其避光；
4）封閉劑需現(xiàn)用現(xiàn)配，干粉溶解后不能長期保存；
5）使用本試劑盒標(biāo)記抗體，其抗體特異性要高，純度不低于90%，最好使用單克隆抗體，溶液環(huán)境不含游離氨基，最好為PBS溶液；標(biāo)記前抗體需去除NaN3和BSA，抗體的透析、濃縮和濃度測定等操作都會造成抗體量的損失，因此標(biāo)記前準(zhǔn)備抗體時需根據(jù)具體情況考慮最適的抗體量；
6）由于抗體修飾后所帶的基團(tuán)容易被重新氧化，因此修飾后抗體需盡快與活化的AP進(jìn)行偶聯(lián)；
7）本試劑盒中的超濾管為特殊處理的，可有效避免酶失活和蛋白吸附損失，市面超濾管可能會對標(biāo)記效率造成影響。
8）本試劑盒中部分試劑為高活性試劑，對皮膚和身體有一定的危害，請全程戴手套操作；DMSO屬微毒類，對人體皮膚有滲透性，對眼有刺激作用，使用時避免與皮膚、眼睛和粘膜接觸。