試劑盒操作流程：

1.抗體的修飾

1）取待標記抗體（純度>90%），濃度調整到 5mg/ml左右為宜，按照每毫克抗體加入2μl 抗體修飾試劑溶液，輕輕混勻，在室溫下避光攪拌反應 90分鐘；

2）反應完畢后，將其轉入30KMWCO超濾管，用標記緩沖液超濾3-5次（每次12000rpm 5min），每次管芯內液體體積不超過原體積1/4為宜，最后一次超濾完成，管芯內液體即為修飾的抗體。

2.活化AP與抗體偶聯

1）用標記緩沖液復溶活化AP凍干粉，得到活化AP溶液，濃度調整為5mg/ml（按1mg活化AP凍干粉加入200ul標記緩沖液復溶）；

2）將修飾抗體與活化AP溶液，按照質量比1:2.5比例（每mg修飾抗體對應2.5mg活化AP溶液）混合，室溫避光反應2小時；

3）將封閉試劑管中加入5ulDMSO,配置成10mg/ml封閉試劑溶液；按照每0.5mg抗體5ul的體積比例加入上述步驟2）反應產物中，封閉未反應完的活性基團；

4）標記好的抗體分裝，加入適當保護劑，-20℃保存備用。

注意事項：

1） 本試劑盒中抗體修飾試劑和封閉試劑為高活性試劑，請-20℃保存；其余成份2-8℃保存、勿凍存。

2）試劑盒組份在運輸過程中可能造成顛倒，會使液體或干粉試劑粘到管壁或瓶蓋上。使用前請離心處理，以使附著管壁或瓶蓋的液體或干粉試劑沉積到管底。

3） 本試劑盒中活化AP凍干粉需要避光低溫保存，一旦復溶請一次性使用完；標記過程盡量保證其避光；

4）封閉劑需現用現配，干粉溶解后不能長期保存；

5）使用本試劑盒標記抗體，其抗體特異性要高，純度不低于90%，最好使用單克隆抗體，溶液環境不含游離氨基，最好為PBS溶液；標記前抗體需去除NaN3和BSA，抗體的透析、濃縮和濃度測定等操作都會造成抗體量的損失，因此標記前準備抗體時需根據具體情況考慮最適的抗體量；

6）由于抗體修飾后所帶的基團容易被重新氧化，因此修飾后抗體需盡快與活化的AP進行偶聯；

7）本試劑盒中的超濾管為特殊處理的，可有效避免酶失活和蛋白吸附損失，市面超濾管可能會對標記效率造成影響。

8）本試劑盒中部分試劑為高活性試劑，對皮膚和身體有一定的危害，請全程戴手套操作；DMSO屬微毒類，對人體皮膚有滲透性，對眼有刺激作用，使用時避免與皮膚、眼睛和粘膜接觸。