服務介紹： 組織芯片免疫熒光染色,是將許多不同處理的組織以規則的微陣列方式排列于同一載體上，同時進行相同指標的免疫熒光檢測。 實驗流程： 1.石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-無水乙醇Ⅰ 6min-無水乙醇Ⅱ 6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水沖洗； 2.抗原修復：組織切片置于盛有檸檬酸（PH6.0)抗原修復液的高壓鍋內進行抗原修復，噴氣計時2.5min， 自然冷卻后將玻片置于 PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌 3 次，每次 5min； 3.滅活：0.3%甲醇過氧化氫滅活15min，PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌 3 次，每次 6min； 4.BSA 或者血清封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈（防止抗體流走），在圈內滴加用 5%BSA，室溫封閉 1h； 5.加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒內 4°C 孵育過夜（濕盒內加少量水防止抗體蒸發）； 6.加二抗：玻片置于 PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌 3 次，每次 8min。切片稍甩干后在圈內滴加與種屬對應的熒光二抗，覆蓋組織，室溫孵育120min。之后玻片置于 PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌 3 次，每次 8min； 7. DAPI染核：滴加 DAPI，室溫孵育10min，之后玻片置于 PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌 3 次，每次 6min； 8.封片：抗熒光淬滅劑封片； 9.鏡檢拍照：切片于熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。（DAPI紫外激發波長330-380nm，發射波長420nm，發藍光；FITC激發波長465-495nm，發射波長515-555 nm，發綠光；CY3激發波長510-560，發射波長590nm，發紅光）。 染色結果判讀：DAPI染出來的細胞核在紫外的激發下為藍色，陽性表達為相應熒光素標記的紅光或者綠光。