乳鐵蛋白檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品名稱： 乳鐵蛋白檢測(cè)試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品編號(hào)： F004
產(chǎn)品價(jià)格： null
產(chǎn)品產(chǎn)地： 北京
品牌商標(biāo)： 北京經(jīng)緯博恒
更新時(shí)間： null
使用范圍：
- 聯(lián)系人 :
- 地址 : 北京市海淀區(qū)萬壽路街道太平路甲40號(hào)22樓411(軍醫(yī)科院南門).廊坊經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)翠微南道29號(hào)(生產(chǎn)基地)
- 郵編 : 100039
- 所在區(qū)域 : 北京
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用兔抗LF的多克隆抗體包被成固相酶標(biāo)板，以識(shí)別并結(jié)合待測(cè)標(biāo)本中的LF,用抗原標(biāo)記生物素（Bio-Ag），用親和素標(biāo)記辣根酶(HRP-A)，向固相酶標(biāo)板中同時(shí)加入標(biāo)準(zhǔn)品（或待測(cè)品）和Bio-Ag，兩者競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合到固相抗體上，反應(yīng)、洗滌后，加入HRP-A，反應(yīng)、洗滌后，酶標(biāo)板上形成Ab-Ag-Bio-A-HRP和Ab-Ag復(fù)合物，加酶底物顯色，用酶標(biāo)儀在相應(yīng)波長(zhǎng)下測(cè)定光密度（OD值），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出待測(cè)標(biāo)本中的LF含量。
試劑盒組成
1.? 真空包裝96孔固相酶標(biāo)板一塊。
2.??????? 凍干的標(biāo)準(zhǔn)品7瓶：分別用標(biāo)準(zhǔn)稀釋液1.0mL溶解，濃度為0、0.1、0.2、0.4、1.0、2.0、5.0μg/mL 。
3.? 生物素化抗原（Bio-Ag）1瓶：5mL。
4.? 酶結(jié)合物1管：20μl，用前每μl加緩沖液1mL稀釋。
5.? HRP-A 稀釋液 1 瓶：10mL。
6.? 顯色劑：A為凍干品：2瓶，B為液體：2瓶。 臨用前1瓶A加1瓶B溶解。
7.? 終止液1瓶：5mL。
8.? 洗滌液1瓶：用前用蒸餾水20倍稀釋。
9.? 實(shí)驗(yàn)緩沖液 1 瓶：10 mL
注意事項(xiàng)
1 操作??? ⑴為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，標(biāo)準(zhǔn)品必須做雙孔；條件允許的情況下標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控、樣品均應(yīng)做雙孔。 ⑵為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板鋪于有濕布的密閉盒內(nèi)。⑶血清、枸櫞酸鹽或EDTA抗凝血漿均可檢測(cè)，但血清或血漿中殘存凝塊或紅細(xì)胞須經(jīng)離心去除。⑷標(biāo)本在2-8℃可貯存3天，超過3天應(yīng)放入-20℃，避免反復(fù)凍融。 ⑸分別用加樣器頭吸取每份標(biāo)本，避免相互交叉。⑹底物易于氧化且對(duì)光敏感，一定要用前配置，用后的底物液必須棄去，不可再用。⑺顯色時(shí)室溫應(yīng)在20-25℃。
2 試劑盒儲(chǔ)存條件??? ⑴試劑盒所有試劑均儲(chǔ)存于4℃。⑵酶標(biāo)板在真空條件下可存放6個(gè)月，打開后若不能一次用完，請(qǐng)裝于密封性好的袋子內(nèi)，于4℃干燥處保存，并在一個(gè)星期內(nèi)使用。⑶標(biāo)準(zhǔn)品溶解后于4℃保存可使用一個(gè)月。⑷Bio-Ag、HRP-A每次吸取時(shí)應(yīng)盡量避免污染，4℃保存可使用6個(gè)月。若液體出現(xiàn)渾濁則活性不可再用。
樣品準(zhǔn)備
取靜脈血分離血清，待測(cè)；如不立即測(cè)量，可將樣本密封后，置于2~8℃或-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè)，2~8℃保存不應(yīng)超過48小時(shí)，-20℃保存不超過2個(gè)月。
操作步驟
1. ELISA測(cè)定LF操作步驟見下表：? 加樣量（μl）
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孔別 試劑 |
NSB孔???? 標(biāo)準(zhǔn)孔???? 樣品孔 |
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緩沖液 |
100????????? —???????? — |
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S0-S5 |
—?????????? 50???????? — |
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樣品 |
—????????? ?—???????? 50? |
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Bio-Ag |
—?????????? 50???????? 50????????? |
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置于37℃反應(yīng)1.5 h，用洗滌液洗板4次，甩干 | |
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酶結(jié)合物 |
100???????? 100???????? 100?????? |
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置于37℃反應(yīng)0.5 h，用洗滌液洗板7次，甩干 | |
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顯色液 |
100???????? 100???????? 100????????? |
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室溫避光顯色10min | |
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終止液 |
50?????????? 50???????? 50?????????? |
操作完后用酶聯(lián)儀在490nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔OD值。
2 計(jì)算 ⑴用酶標(biāo)儀上的ELISA自動(dòng)分析軟件對(duì)所測(cè)OD值進(jìn)行處理，選雙對(duì)數(shù)法繪制曲線，直接得出樣品濃度。⑵以標(biāo)準(zhǔn)物濃度為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)濃度。
本試劑盒的技術(shù)參數(shù)
1 靈敏度：本測(cè)定法靈敏度為0.1μg/mL。
2 精密度：用本法同時(shí)及不同時(shí)間檢測(cè)8份樣品，批內(nèi)變異系數(shù)7.4，批間變異系數(shù)為6.3。
3 準(zhǔn)確度：⑴該抗血清與CRP（10μg/mL）、 巨球蛋白(270mg/mL)、 a 1-AT（81 μg /mL）均無交叉反應(yīng)。⑵向已知濃度血清中加入定量的LF抗原測(cè)定回收率，其低濃度回收率為93.8 , 高濃度回收率為103.3 。
正常參考值
正常獻(xiàn)血員血清樣品80份測(cè)得正常參考值： 0.255-0.621μg/mL。
建議各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)條件建立自己的正常對(duì)照組。