Sephadex G-25 medium 葡聚糖凝膠G-25-蛋白純化-試劑-生物在線
北京索萊寶科技有限公司--實驗室產品
Sephadex G-25 medium   葡聚糖凝膠G-25

Sephadex G-25 medium 葡聚糖凝膠G-25

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產品名稱: Sephadex G-25 medium 葡聚糖凝膠G-25

英文名稱: 分子篩/蛋白純化/蛋白提純/預裝柱填料/純化填料

產品編號: S8140-25

產品價格: 0

產品產地: 中國/北京

品牌商標: Solarbio

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使用范圍: null

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 葡聚糖凝膠使用說明書
貨號????? 產品名稱???? ? 分離范圍???????????????? ?產品應用
S8121? 葡聚糖凝膠G-10? <700?? ?緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子
S8131? 葡聚糖凝膠G-15? <1500?? ?緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子
S8141? 葡聚糖凝膠G-25? 1000-5000??工業上脫鹽及交換緩沖液
S8151? 葡聚糖凝膠G-50? 1000-30000?多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定
S8161? 葡聚糖凝膠G-75? 2000-70000?蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定
S8171? 葡聚糖凝膠G-100? 2000-120000?蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定
S9191? 葡聚糖凝膠G-150? 5000-300000?蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定
S9160? 葡聚糖凝膠G-200? 5000-600000?蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數測定
化學和物理性質:
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質溶液中溶脹。 G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯度,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。 葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。
葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要極高分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,可在較低的壓力下獲得較高的流速。 另外,粗級也可用于批量工藝。
化學穩定性:
葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑(除非它被化學降解)。 它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩定的,在強酸中凝膠骨架的糖昔鍵被水解。 長期接觸氧化劑將破壞凝膠,因而應避免使用。
物理穩定性:
葡聚糖疑膠并不熔融,可以在濕態、中性PH進行滅菌或在高壓滅菌器120℃、30分鐘而不影響它的色譜性質。 干態的凝膠加熱至120℃以上將開始焦糖化。 葡聚糖凝膠的機械強度取決于交聯度。
使用方法:
1. 葡聚糖凝膠預處理:
在室溫下,將葡聚糖凝膠干粉浸泡于蒸餾水中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,或者用蒸餾水煮沸至少1小時直至充分溶脹,凝膠體積不再變化。
注:在溶脹前,加入蒸餾水攪拌后使其自然沉降,沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多,需要重復多次漂洗將其除去,防止層析時阻塞凝膠柱,影響流速。
2. 裝柱:
將溶脹好的凝膠根據裝柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態裝柱,并避免柱內產生氣泡或斷層; 裝柱要均勻,可在凝膠耐受的操作壓下裝柱,裝好的凝膠柱可以檢測柱效,檢測過濾柱裝填是否合格。
凝膠層析分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度:分級分離時,一般需要 100cm 左右長的層析柱,柱高與直徑之比為 20:1-100:1,柱高過高時,凝膠擠壓變形阻塞會引起較大的反壓,應當盡可能避免;分組分離(例如脫鹽)時用短柱,柱高控制在40-50cm 以下,柱高與直徑的比約為 5:1-10:1。
3. 平衡:
上樣前用平衡液平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩為止(例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
4. 上樣:
分級分離時上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積。
樣品溶液如有雜質或沉淀應過濾或離心除去,樣品的粘度不能過高,否則影響分離效果。
5. 洗脫方法:
可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以完全分離純化;
6. 在位清洗(CIP)
凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。 方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。
7. 保存
凝膠柱暫時不用,可將其回收,一般方法?將凝膠用水沖洗干凈濾干,可加入0.02%疊氮化鈉防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生長。
備注:
其它規格葡聚糖凝膠處理方法類似。
葡聚糖凝膠G-10? 膨脹系數為2-3倍,有效期為1年;
葡聚糖凝膠G-15? 膨脹系數為2.5-3.8倍,有效期為1年;
葡聚糖凝膠G-25? 膨脹系數為4-6倍,有效期為1年;
葡聚糖凝膠G-50? 膨脹系數為8-10倍,有效期為6個月;
葡聚糖凝膠G-75? 膨脹系數為10-12倍,有效期為3個月;
葡聚糖凝膠G-100 膨脹系數為12-15倍,有效期為2個月;
葡聚糖凝膠G-150 膨脹系數為14-16倍,有效期為2個月;
葡聚糖凝膠G-200 膨脹系數為15-18倍,有效期為2個月。