NP-69細(xì)胞/NP69細(xì)胞/NP-69/NP69/人永生化鼻咽上皮細(xì)胞-細(xì)胞株/菌種-試劑-生物在線

NP-69細(xì)胞/NP69細(xì)胞/NP-69/NP69/人永生化鼻咽上皮細(xì)胞

商家詢價(jià)

產(chǎn)品名稱： NP-69細(xì)胞/NP69細(xì)胞/NP-69/NP69/人永生化鼻咽上皮細(xì)胞

英文名稱： NP69 NP-69

產(chǎn)品編號(hào)： iCell-h431

產(chǎn)品價(jià)格： 1800

產(chǎn)品產(chǎn)地：上海

品牌商標(biāo)： iCell

更新時(shí)間： 2026-06-17T10:08:25

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賽百慷（上海）生物技術(shù)股份有限公司

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產(chǎn)品詳情

<div id="a1" class="tab-pane active"> <div id="d1" class="p2"> 細(xì)胞介紹 該細(xì)胞采樣于男性年齡不詳，咽，鼻咽部組織分離培養(yǎng)，通過(guò)SV40猿猴病毒轉(zhuǎn)化細(xì)胞系，又名NP69SV40T 細(xì)胞特性 1） 來(lái)源：咽；鼻咽部 2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng) 3） 含量：>1x106  細(xì)胞數(shù) 4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5)  用途：僅供科研使用。 運(yùn)輸和保存 干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞 （1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。 （2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 細(xì)胞接收后的處理 1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。 2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。 3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。 4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。                   一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備 1）準(zhǔn)備 角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 (推薦：iCell-0019培養(yǎng)基，包含兩個(gè)組份：基礎(chǔ)培養(yǎng)基1瓶+生長(zhǎng)因子1管：1mL或者5mL兩種）添加對(duì)應(yīng)因子按照收到的生長(zhǎng)因子對(duì)應(yīng)規(guī)格：1mL加0.2%, 5mL 加1%，同時(shí)添加0.2ng/ml EGF；2% FBS ; 1% P/S 來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。或者 準(zhǔn)備Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)同時(shí)添加0.2ng/ml EGF；2% FBS ; 1% P/S  來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 備注: 1、Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培養(yǎng)液包含兩個(gè)組份：基礎(chǔ)培養(yǎng)基1瓶500mL（貨號(hào)10785-012）+生長(zhǎng)因子1管1mL  ( 貨號(hào)10784-015). 2、由于角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基或者Defined K-SFM為無(wú)血清培養(yǎng)液無(wú)法終止胰酶消化，所以消化完成后要通過(guò)離心（建議125xg離心5到10分鐘）去除胰酶或者用帶10%血清的培養(yǎng)基來(lái)終止消化，再進(jìn)行后續(xù)操作。 2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3）凍存液：完全培養(yǎng)液92.5%，7.5%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。 4）傳代比例：如果沒有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是1:2。傳代周期：4-6天，換液頻率：每周 2-3次。 二．細(xì)胞處理 1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇 將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。 2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。  3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。 3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。 下面T25瓶為例； 1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×10^7個(gè)活細(xì)胞/ml. 2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞，按每1ml凍存液含1×10^6~1×10^7個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。 3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過(guò)夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。 </div> </div>

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