高靈敏TMB可溶性顯色液（HRP底物）
產品名稱： 高靈敏TMB可溶性顯色液（HRP底物）
英文名稱：
產品編號： H05
產品價格： 0
產品產地： shanghai china
品牌商標： willget
更新時間： null
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上海文淵閣生物科技有限公司
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一管式TMB可溶性顯色液(適用ELISA)
?? TMB，即3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine，是辣根過氧化物酶的常用底物，無致癌性。在辣根過氧化物酶或其他適當過氧化物酶的催化下，TMB會產生可溶性藍色產物。藍色產物通?？梢栽?70nm或620-650nm測定吸光度。辣根過氧化物酶催化TMB顯藍色后可以使用2M H2SO4終止反應。加入硫酸后，溶液呈黃色，此時可以在450nm測定吸光度。通常的TMB顯色試劑由多個組份組成，必須在使用前進行配制，并且容易產生沉淀，使用不方便，并且也容易導致檢測結果不穩定。本TMB顯色液采用了單一組分TMB顯色技術，簡化了操作步驟，并且使檢測結果更加穩定可靠。
? ?本試劑盒最常用于ELISA檢測，也可以用于檢測血液或血紅蛋白等樣品中的過氧化物酶含量。
? ?用于ELISA檢測時，每個樣品通常使用0.2毫升顯色液，一個包裝的本產品共可以檢測約500個樣品。
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包裝清單：
一管式TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)?? 100ml
4℃避光保存，一年有效。
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使用說明：
1. 對于ELSIA檢測：
a. 參考ELISA試劑盒的實驗步驟，在與辣根過氧化物酶標記的抗體孵育后，用適當洗滌液洗滌3-5次，每次3-5分鐘。
b. 洗滌完畢后，去除洗滌液，加入200微升TMB顯色液。
c. 37°C孵育5-20分鐘或更長時間(可長達24小時)，直至顯色至預期深淺。
d. 直接在370nm或620-650nm測定吸光度。或加入50微升2M H2SO4終止反應，隨后在450nm測定吸光度。
2. 對于在96孔板內進行的其他適當檢測 (例如檢測組織或細胞樣品內源性的過氧化物酶)：
a. 直接在96孔板內每孔加入10-20微升樣品。
b. 加入200微升TMB顯色液。
c. 37°C孵育5-20分鐘或更長時間(可長達24小時)，直至顯色至預期深淺。
d. 直接在370nm或620-650nm測定吸光度?；蚣尤?0微升2M H2SO4終止反應，隨后在450nm測定吸光度。
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常見問題：
1. 背景顯色太深。
a. 如果背景(沒有樣品的對照)顯色太深，一方面需考慮使用適當的封閉液進行封閉，例如選購適當的封閉液或使用和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉。另一方面，請選購經過適當吸附的二抗，以減小二抗的非特異性吸附。
b. 可以考慮縮短顯色時間，或降低二抗濃度。另外，選擇適當強度的洗滌液，或延長洗滌時間也會有所幫助。
2. 沒有顯色或顯色太弱。
a. 適當提高一抗或二抗的濃度。檢測二抗效果，滴一滴稀釋二抗在離心管內，檢測二抗是否可以被正常顯色。
b. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系，例如使用生物素檢測體系。
c. 可以適當延長顯色時間。
d. 如果上述改進不能獲得預期效果，可以考慮更換效果更好的一抗或ELISA試劑盒。
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