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ELISA的血樣本在收集、處理和保存方面要考慮的幾個問題

(1)標本在保存中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。

(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染。一是細菌的生長所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用；二是一些細菌的內源性酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。

(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2～8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。

(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。

(5)要注意避免出現溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。

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