抗體噬菌體展示服務|抗體發現服務
產品名稱： 抗體噬菌體展示服務|抗體發現服務
英文名稱： 抗體噬菌體展示服務
產品編號： 抗體噬菌體展示服務
產品價格： 詢價
產品產地： null
品牌商標： null
更新時間： 2024-06-10T15:28:37
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泰克生物致力于為客戶提供高親和力、高特異性的抗體藥物前期發現技術服務，為客戶的后續的CAR-T/CAR-NK先導序列設計、抗體人源化、藥物靶點抗體開發、抗體偶聯藥物（ADC）開發、雙特異性抗體開發以及高效阻斷型中和抗體開發等下游研發工作提供有力支持。泰克生物在藥物抗體發現方面擁有10年的項目開發經驗和心得，能夠為客戶提供高質量的針對包括但不限于蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白以及mRNA等靶點的駝源VHH發現服務以及不同物種（兔源、鼠源、羊源和駝源等）scFv發現服務。
噬菌體展示技術（Phage Display Technology）是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置，通常為M13噬菌體的P3蛋白，使外源基因隨外殼蛋白的表達而展示到噬菌體表面的生物技術。基于噬菌體展示技術（Phage Display Technology），泰克生物能夠為客戶提供高質量的包括但不限于VHH、scFv等單鏈抗體噬菌體展示服務，且噬菌體文庫庫容可達10^8-10^9，文庫多樣性、插入率、陽性率均可達90%以上，滿足各類客戶對于抗體噬菌體展示文庫的質量要求。噬菌體展示的優勢在于其展示納米抗體文庫中變異抗體基因的多樣性，各個重組噬菌體（常用噬菌體為M13噬菌體）表面展示出不同的抗原結合域，相較于傳統雜交瘤方法，噬菌體展示技術在抗體基因展示與篩選層面則具有非常突出的效率優勢（如雜交瘤融合效率一般<0.4%，即1000次融合細胞中，大概4個融合子；而噬菌體展示輕松可以獲得10^8-10^9個正確抗體序列）。同時，泰克生物還能提供抗體噬菌體展示配套的下游抗體體外驗證（包括但不限于親和力驗證、抗體阻斷驗證、交叉反應驗證等多種下游驗證實驗）、抗體人源化、抗體親和力成熟、CAR-T/CAR-NK先導序列設計及細胞殺傷驗證等一站式技術服務，客戶只需要提供具體的實驗需求和靶點信息，泰克生物的科學家均能夠根據客戶的需求進行合理的方案設計和個性化定制，為客戶的科研項目及藥物抗體開發助力。
█ 噬菌體展示抗體文庫構建服務
泰克生物可為客戶提供駝源VHH納米抗體庫，scFv抗體庫等文庫構建以及篩選服務。其中VHH納米抗體庫，又稱為駝源重鏈抗體文庫，抗體分子量大小為15kDa，是駝源動物產生的特有的一種抗體。目前被廣泛應用于CAR-T/CAR-NK治療性的駝源VHH抗體（又被稱為納米抗體）噬菌體展示發現路徑如圖1所示：
圖1基于噬菌體技術平臺的駝源VHH抗體發現服務
█ 服務內容和周期
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步驟 |
服務內容 |
QC標準 |
周期 |
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Step1：抗原準備 |
*抗原類型： (1) 重組蛋白制備 (2) 小分子（改造）+偶聯 (3) 多肽合成+偶聯 (4) 客戶提供滅活病毒 (5) 客戶提供封裝好的mRNA |
抗原QC標準： 重組蛋白3-3.5mg(純度>85%)； 小分子純度>90%； 多肽純度>90%；
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4-6周 |
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Step2:動物免疫 |
(1) 動物免疫4次，加強免疫一針，共計免疫5針； (2) 免疫前采集陰性血清，第4針采血進行ELISA檢測血清效價； (3) 若第4針血清抗體效價滿足要求，則采血前7天再次加強免疫1針，如不滿足要求，則繼續常規免疫； (4) 效價合格，采血分離單核細胞； |
動物：背景清晰； 免疫：蛋白/病毒抗原效價>10^5；多肽/小分子抗原效價>10^4； |
10周 |
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Step3:模板cDNA制備 |
(1) PBMC總RNA提取 (2) 高保真RT-PCR制備cDNA |
cDNA：膠圖分布均勻； |
1 天 |
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Step4:噬菌體展示文庫構建 |
(1) 以cDNA為模板，兩輪PCR法擴增VHH基因； (2) 噬粒構建與轉化： VHH基因拼接噬菌粒載體，電擊轉化TG1宿主菌，構建抗體庫； (3) 鑒定：隨機挑選24個克隆，PCR鑒定陽性率+插入率 (4) 輔助噬菌體準備：M13噬菌體擴增+純化； (5) VHH展示文庫救援 |
文庫陽性率：>90%； 文庫插入性率：>90%； 庫容：>10^8 |
2-3周 |
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Step5:文庫篩選（3輪篩選）(固相篩選) |
(1) 抗原包被（單個蛋白篩選，常規默認是固相篩選法或磁珠分選）； (2) 默認3輪篩選：壓力篩選，最大限度去除非特異性抗體； (3) 挑取單個克隆擴增噬菌體+IPTG誘導表達+ELISA檢測陽性克隆； (4) 挑取全部陽性克隆進行基因測序； |
ELISA陽性標準：P/N>3； VHH篩選標準：CDR氨基酸序列不同 |
2-3周 |
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Step6:抗體驗證 |
(1) 將獲得的抗體序列構建合適的表達載體進行表達+親和純化+抗體蛋白定量； (2) ELISA驗證抗體與抗原結合; (3) BLI法驗證抗體親和力； (4) 細胞功能驗證：流式阻斷驗證； |
重組抗體1mg，純度90%； 快速親和力測定結果； 阻斷驗證結果； |
4-6周 |
█ 服務優勢
-- 物種適應性廣泛：人，鼠，兔，羊，羊駝，駱駝，魚等物種的單抗開發均兼容（不適用牛源單抗開發）
-- 多種駝源免疫可供選擇，包括但不限于大羊駝llama、小羊駝Alpaca以及駱駝等，且動物來源背景清晰
-- 擁有免疫基地：動物資源充足，包括但不限于駝源、鼠源、兔源以及羊源等
-- 開發周期短：獲得PBMC后，建庫到篩選獲得抗體序列4-6周
-- 多種抗體庫噬菌體展示可選：VHH抗體庫展示、scFv抗體庫展示等
-- 多種靶點抗體發現服務可選：蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白、mRNA等（可針對具體的項目需求設計定制化的多種類型抗原搭配的免疫方案）
-- 技術平臺成熟：庫容可達10^8-10^9，插入率均滿足>90%，篩選獲得的抗體親和力普遍處于nM- pM級別
-- 高標準交付：效價保證、文庫質量保證、高親和力和高特異性抗體保證，為客戶的下游實驗提供有力支持
-- 實驗記錄可追溯：QC質控標準（免疫效價、PBMC質控、文庫質控及篩選驗證質控），中英文實驗報告，原始實驗記錄
-- 一對一個性化方案定制（包括免疫方案、建庫方案、篩選方案以及后續的體外表達驗證方案等），滿足各類客戶的科研項目需求
-- 文庫篩選方式多樣性：根據客戶項目需求設計最佳的篩選方式，如固相篩選、液相篩選、細胞篩選、磁珠篩選等
-- 可提供一系列配套的下游藥物抗體開發服務，抗體體外表達驗證、抗體人源化、抗體親和力成熟、雙特異性抗體開發、CAR-T先導序列分子設計、抗體偶聯藥物（ADC）開發等