Antarctic Phosphatase 熱敏磷酸酶 (5 U/μL)
產品名稱： Antarctic Phosphatase 熱敏磷酸酶 (5 U/μL)
英文名稱： Antarctic Phosphatase 熱敏磷酸酶 (5 U/μL)
產品編號： 14511ES
產品價格： 詢價
產品產地： Yeasen
品牌商標： Yeasen
更新時間： 2026-05-09T13:22:07
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Antarctic Phosphatase（簡稱Anp）來源于重組表達的南極細菌不耐熱堿性磷酸酶， 以同源二聚體和單體為常見形態。可非特異性催化 DNA 和 RNA 的 5´ 和 3´ 末端磷酸單酯的去磷酸化，水解核糖核苷酸和脫氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。該酶在 75℃ 下加熱 5 分鐘即可完全且不可逆地失活，因此無需在連接或末端標記前去除。此外，該酶還可用于蛋白質絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的去磷酸化。
- 快速去磷酸化: 37℃孵育15 min即可完成反應；
- 快速失活: 75℃處理5 min即可完全不可逆失活；
- 使用便捷: 在多種內切酶和PCR緩沖液中保持活性，可與質粒DNA酶切同步進行；
- 兼容性強: 適用于5’或3’突出末端、平端等各類DNA末端，操作步驟統一，便于后續連接反應。
- 快速失活: 75℃處理5 min即可使酶完全失活
分別將AnP在75℃處理5 min（黃色）后，以pNPP為底物進行酶活測定，結果顯示75℃處理5 min即可實現完全失活。
圖1. 翌圣AnP滅活條件驗證
- 性能驗證：Anp對酶切后載體進行脫磷處理可以大大降低載體酶切后的自連率
單酶切轉化驗證：將pUC19質粒經HindIII單酶切后，用AnP在37℃下處理15min，再于75℃滅活5min。經T4 DNA連接酶連接并轉化至DH5α感受態細胞后，載體自連率顯著降低，背景轉化子明顯減少。
圖2. 翌圣AnP對單酶切后載體脫磷降低自連率驗證
雙酶切轉化驗證：pUC19質粒經HindIII/NdeI雙酶切過夜后，使用翌圣Anp在37℃條件下脫磷處理15 min，隨后75℃滅活5 min。加入經HindIII/NdeI雙酶切后332 bp的PCR產物片段，用T4 DNA連接酶進行連接并轉化DH5α。從該平板挑取7個單克隆，利用pUC19特異性引物進行菌落PCR驗證。結果顯示載體自連率顯著降低，背景轉化子明顯減少。
圖3. 翌圣AnP對雙酶切后載體脫磷降低自連率驗證
- 切口酶、核酸外切酶、DNase和RNase殘留低
經瓊脂糖凝膠電泳檢測，三批次AnP與核酸底物共同孵育后，電泳條帶清晰、單一，未見降解或拖尾現象。結果表明，該產品純度極高，切口酶、核酸外切酶、DNase和RNase殘留極低，可有效保障實驗結果的準確性與可靠性。
圖4. 翌圣AnP切口酶、核酸外切酶、DNase和RNase殘留檢測結果
-25~-15℃儲存，有效期2年。