神經(jīng)系統(tǒng)
產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)系統(tǒng)
英文名稱: nervous system
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神經(jīng)系統(tǒng)
神經(jīng)科學(xué)是近年來快速發(fā)展的前沿學(xué)科,以病毒載體為介導(dǎo)的機制研究、基因治療及神經(jīng)環(huán)路是神經(jīng)研究的熱點。
作為神經(jīng)系統(tǒng)研究的關(guān)鍵工具,病毒載體具有感染效率高、操作方便等優(yōu)勢,比較常用的病毒載體包括腺相關(guān)病毒、慢病毒、腺病毒等,如何根據(jù)自己的實驗需求選擇合適的病毒載體呢?
1.? 慢病毒:慢病毒對原代神經(jīng)元細(xì)胞感染效率高、毒性低、損傷小,在感染后 2-4 天開始表達(dá),并且可以長時間穩(wěn)定表達(dá)外源基因,因此原代神經(jīng)元細(xì)胞感染,通常首選慢病毒。在體注射時,慢病毒的優(yōu)點是可以將靶基因整合入宿主的基因組中持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá),且引起來的免疫反應(yīng)溫和,可用于定點注射。
2.? 腺病毒:神經(jīng)領(lǐng)域的研究較少使用腺病毒載體進行,因其易引起較強烈的免疫反應(yīng),嚴(yán)重時可導(dǎo)致實驗動物死亡。
3.? 腺相關(guān)病毒(AAV):與慢病毒相比,AAV體積小,滴度高,擴散性好,且具有更強的嗜神經(jīng)特性。運用AAV載體的另一個顯著優(yōu)點是有些AAV血清型,如PHP.eB,可穿過血腦屏障、胎盤屏障,可通過尾靜脈注射使用。此外AAV1,AAV Retro等血清型還可用于神經(jīng)環(huán)路標(biāo)記。
了解了這些病毒載體在神經(jīng)系統(tǒng)應(yīng)用中的優(yōu)勢和不足后,如何根據(jù)具體的實驗需求和基因情況選擇合適的病毒載體呢?我們需要考慮這幾個方面:
1. 工具載體的表達(dá)時間與實驗觀察時間是否相符;
2. 工具載體可以容納的片段大小與目的基因大小是否契合;
3. 工具載體對目的細(xì)胞、在體組織的轉(zhuǎn)導(dǎo)是否足夠高效。
下表總結(jié)了常用基因操作工具的選擇方法:

吉凱小建議
1.? 在體實驗建議選擇腺相關(guān)病毒,它具有滴度高,擴散效果好,免疫原性低等特點。且AAV 1/2/5/8/9/retro/ PHP.eB/ PHP.S 等血清型對神經(jīng)系統(tǒng)均具有較好的親和性,如1型可作為順行示蹤跨單突觸標(biāo)記的血清型使用 、9型可作為順行示蹤非跨突觸標(biāo)記的血清型使用、Retro可作為逆向示蹤非跨突觸標(biāo)記的血清型使用。 PHP.eB,適合中樞神經(jīng)系統(tǒng),可穿過血腦屏障、胎盤屏障,常通過尾靜脈注射使用;PHP.S,適合周圍神經(jīng)系統(tǒng),可穿過血腦屏障、胎盤屏障,常通過尾靜脈注射使用。

2.? 原代神經(jīng)元體外感染建議選擇慢病毒:慢病毒在感染原代神經(jīng)元后2-4?天開始表達(dá),且對神經(jīng)元細(xì)胞的毒性低、損傷小。
3.? 如需目的基因在某一類神經(jīng)元或膠質(zhì)細(xì)胞中特異性表達(dá),可使用特異性啟動子。吉凱提供組織特異性啟動子載體的病毒包裝服務(wù),點擊了解>>

神經(jīng)系統(tǒng)病毒用量參考
以下表格中為吉凱客戶應(yīng)用文獻(xiàn)總結(jié)(部分)。更多神經(jīng)系統(tǒng)病毒注射參數(shù),點擊查看與下載>>
1.?腺相關(guān)病毒AAV



2. 慢病毒




