真核生物中mRNA經轉錄后修飾可在5'端形成一個特殊結構，即帽子結構，該結構對mRNA的穩定、轉運與翻譯過程均有較重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子結構的有效酶，其由D1和D12兩個亞基組成，兼具RNA三磷酸酯酶活性（TPase）、鳥苷?；D移酶活性（GTase）和鳥嘌呤甲基轉移酶活性（N7 MTase）。牛痘病毒加帽酶參與作用下的mRNA加帽過程，在mRNA 5'端添加一個7-甲基鳥嘌呤帽結構（m7Gppp），即為Cap0。

mRNA +1位核苷酸的核糖2’位羥基也可以甲基化，產物稱為Cap1，人類的mRNA都具有Cap1結構。Cap1不僅與翻譯起始有關，在針對外源RNA的先天免疫系統中，還可作為自身RNA的標志。2-O-甲基轉移酶可以在mRNA +1位核苷酸的2´-OH位置處添加一個甲基基團，最終形成最有Cap1結構的mRNA。

該產品主要應用于RNA體外轉錄之后加帽，形成具有Cap1帽子結構的mRNA。

加帽率高：加帽率可高達99%

產品穩定性強：批次差異CV<5%

適用性強：加帽的mRNA可應用于多種場景。

操作簡單：兩步法加帽需要的牛痘病毒加帽酶等物料均包含在試劑盒里。

1、加帽率數據：分別對2K 和4K的片段參照說明書進行操作，使用LC-MS對2K的序列進行加帽率檢測，加帽率都在99%以上。

圖1：2K加帽率解卷積分子量圖譜

圖2：4K加帽率解卷積分子量圖譜

2、批次穩定性數據

對4K 片段分別進行批次間的穩定性驗證，批次間的CV<5%, 加帽率也均在99%以上。

3、完整度高

采用CE的方法分別對2K、4K的片段進行完整度檢測，2K和4K的完整度>92%，9K的完整度>87%。

-25~-15℃保存，有效期1年。