建立高靈敏度和特異性的白介素8?(?IL?-?8)?EL?ISA?法。用人工重組的IL?-?8?多次免疫兔,?獲取高效價抗 體。純化抗體經生物素標記,?同辣根過氧化酶(HRP)?標記的親和素可特異結合。采用純化的抗體包被96?孔 板,?形成固相抗體。加入不同濃度標準品后,?反應1.?5h?,?洗凈后再加入生物素標記抗體,?以酶標記親和素作為 探針,?經酶底物顯色反應可獲得良好的EL?ISA?標準曲線。該方法測定范圍為0.?2?-?10.?8ng/?mL?,?最低測出值為 0.?02ng/?mL?,?批內和批間CV?小于8?%和10?%。用該法測得18?名正常人血漿中IL?-?8?水平為0.?15?±0.?06ng/ mL?。18?份高低不同濃度IL?-?8?水平的血清樣品經本法和RIA?測定其均值為0.?54?±0.?35ng/?mL?和0.?63?±0.?59 ng/?mL?,相關性強(?r?=?0.?819?,?t?=?5.?89)?。在U937細胞系體外培養液中,?L?PS?刺激24h?和48h?可測出IL?-?8?水平 明顯上升;?而經TNF?-α刺激24h?和48h?后同對照沒有明顯變化。該方法操作簡便,?具有較強靈敏度和特異 性,可滿足人血清和細胞培養液中IL?-?8?水平的檢測。