iTRAQ(isobaric tag for relative and absolute quantitation)定量蛋白質組是基于對肽段的NH2-進行標記，將來自不同樣品的同一個肽段做上不同的標記，通過標記物質的含量來指示肽段的含量，并根據肽段含量推斷出對應蛋白質的含量。該方法因其標記效率高、靈敏度高、定量準確以及一次可以標記至多8個樣品等特點，是目前非常流行的定量蛋白質組方法，可以快速發現不同處理、不同突變體、不同環境條件影響的蛋白質組的差異，并且鎖定差異蛋白質進行功能研究。

?????????????????????????????????圖：8標記iTRAQ定量蛋白質的流程

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??iTRAQ技術服務優勢：

l?? 靈敏度高，檢測限低，可檢測出低豐度蛋白；

l?? 分離能力強，分析范圍廣，可以對任何類型的蛋白質進行分離鑒定，包括高分子量蛋白質、酸性蛋白和堿性蛋白，膜蛋白和不溶性蛋白；

l?? 高通量：同時對8個樣本進行分析，提高了實驗通量，可同時對多個時間點或不同處理的蛋白質進行分析；

l?? 結果可靠：定性與定量分析結果更加可靠；

l?? 自動化程度高：液相與質譜聯用，自動化操作，分析速度快，分離效果好。

我公司的技術特點：

l? 高效率樣品前處理：進行high pH RP-HPLC高效分離，自動化收集保證均一性。

l? 高鑒定率：系統全面地研究組織或細胞中盡可能多的蛋白質，可鑒定多達6000種蛋白(以人HepG2為例)。

l? 定量精確：每組平行比較可以做8個樣本，單個樣品標記效率可以達到98%，8標記同時做可減少樣本處理和分批上質譜造成的實驗誤差。

l? 質控嚴格：我們在蛋白提取、多肽酶解、iTRAQ標記等處設定嚴格的質控，保證實驗操作沒有問題。

l? 儀器性能優良：AB SCIEX 5600-plus是基于高分辨率(~30000)、高質量精度(小于2ppm)質譜平臺，可獲得更加準確的結果。此外，該儀器無物種特異性限制，理論上可用于所有物種。

服務內容及實驗流程：

l? 樣本制備與定量；

l? 酶切、iTRAQ試劑標記；

l? 除鹽；

l? 等量混合標記肽段；

l? MS/MS質譜檢測及分析；

l? 相關生物信息分析；

l? 實驗報告提交

信息分析內容：

l? 蛋白質鑒定、定量

l? 蛋白質GO注釋、Pathway代謝通路注釋

l? 差異蛋白GO、Pathway功能富集分析

l? 技術重復性分析（僅針對有重復設計的項目）

l? 多樣品間表達模式聚類（適用于樣本數≥3的項目）

實驗報告內容：

l? 蛋白質鑒定和定量分析結果；

l? 顧客指定蛋白質對應的質譜峰圖；

l? 完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等；

l? 詳細的數據分析結果展示

客戶送樣須知：

1、????? 您只需提供待測樣本，無需提供其他試劑；

2、????? 您所提供的待測蛋白量應≥50ug，濃度≥5ug/uL，否則同位素無法標記；

3、????? 您也可以選擇直接提供組織或者細胞，后續操作由我們進行。

4、????? 蛋白質樣本需用干冰或液氮寄送，武漢地區客戶可上門收樣。

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