ProClin300診斷試劑防腐

為解決生物樣本處理過程中保存期短問題，上海閃晶分子生物科技有限公司推出SUPELCO公司新一代高效生物防腐劑ProClin300，可以有效地控制體外診斷試劑中微生物的生長。當濃度達到0.02%條件下，ProClin系列防腐劑具有廣譜抗菌活性，能在比較長的時間內抑制細菌、真菌和酵母菌等微生物的生長；同時，它又能保持體系中酶的活性，因此它是一種理想的可替代硫*撒、疊氮化鈉和慶大霉素等生物防腐劑。

一、ProClin 系列防腐劑的優點

• 廣譜抗菌性，作用速度快；良好的與酶的相容性，不會影響與酶或抗體的相關反應。
• 使用劑量少，6-20ppm的ProClin300即可達到抑菌的目的。
• pH適用范圍廣（pH2-8.5^*）,化學穩定性好。經實驗室檢測，在25度下保存2年，該防腐劑的活性組分僅損失3%。
• 毒性遠低于同類產品硫柳*。
• 與水可以任意比混合。

二、ProClin 系列防腐劑作用原理

ProClin 系列防腐劑的活性成分主要是2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮（MCI）和5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮（CMCI）。這兩種成分抑制細胞的生長以及促使細胞凋亡的原理相同?；钚猿煞衷谂c細胞膜接觸幾分鐘后，立即可以滲透到膜內并抑制細胞內酶的活性（見圖1）。目標酶處于細胞代謝KREBS循環的中心位置，ProClin 系列防腐劑作用KREBS循環的四個不同位置(見圖2)：丙酮酸脫氫酶(pyruvate dehydrogenase)，a -酮戊二酸脫氫酶(ketoglutarate dehydrogenase)，琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase)和NADH脫氫酶(NADH dehydrogenase)。從而抑制細胞生長代謝，大分子的合成，引起細胞內能量水平迅速下降。由于能量體系的崩潰，細胞不能合成日常代謝所需要的化合物。所有的細菌及真菌至少擁有部分KREBS循環，所以ProClin 系列防腐劑的適用的范圍非常廣泛。其次，ProClin 系列防腐劑具有多標靶作用位點，因此大大降低了因變異產生的微生物的耐藥性。隨著KREBS循環被阻斷，細胞產生能量（以合成ATP為標志，見圖3）和合成酶等生物活性物質的能力迅速下降，但其使用劑量卻保持比較低的水平對人畜無害。

三、ProClin 系列防腐劑性能

1. ProClin 系列防腐劑對診斷試劑影響：

實驗數據表明，ProClin 系列防腐劑不會對診斷試劑中的關鍵酶與底物的結合速率產生影響比如：辣根過氧化酶（HRP），堿性磷酸酶（AP）。

圖4. 250ppmProClin300對HRP(AP)與底物結合速率的影響

短期效應

即使ProClin300的使用濃度超過推薦濃度15倍時，其短期內對于HRP和AP的Km和Vmax 無影響（見表1）。

表1.ProClin300對HRP和AP的Vmax的影響

　 長期效應

長期使用ProClin 300同樣不會對酶（例如：HRP和AP，見圖5）的活性產生影響。

圖5. 4度(37度)下ProClin對AP (HRP)活性的影響 2. ProClin系列防腐劑對抗體結合的影響

在推薦使用濃度下，ProClin 系列防腐劑不會對抗體的結合產生影響。通過研究ProClin 300對經純化過小鼠IgM抗原與聯結HRP的抗-小鼠IgM抗體之間結合的影響，表明濃度在300ppm以下，ProClin 300不會對其產生影響（見圖6）。50ppm的ProClin 300保存上述抗體35天同樣無影響。

圖6. ProClin300對連接HRP的抗體影響 四、ProClin系列防腐劑的參數