神經元順向跨多標記
產品名稱： 神經元順向跨多標記
英文名稱： 神經元順向跨多標記
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武漢樞密腦科學技術有限公司
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神經元順向跨多標記
簡介
大腦神經網絡是由數目龐大，以及形態、功能各異的神經元，通過突觸連接構成的復雜結構，是大腦行使認知、情感、記憶及想象等活動的結構基礎。提示大腦神經網絡的結構是理解大腦處理信息的機制的前提，傳統的示蹤方法促進了人們對大腦神經網絡結構的認識，但難以用于研究多個腦區、多種類型神經元通過突觸連接形成復雜的神經網絡，這類神經網絡才是大腦處理特定信息所依賴的環路。
解析大腦不同腦區、不同類型神經元之間的神經環路連接是神經科學研究的重要任務之一，繪制大腦連接體圖對于理解大腦如何工作是至關重要的，病毒工具是目前最為有效、應用最廣的神經環路示蹤工具。神經回路是神經功能的基本單位，是連接大尺度（結構/功能）和小尺度（分子/信號通路）的橋梁，有效地繪制神經回路需要逆行和順行示蹤病毒同時傳輸多級或單級突觸。目前，順向跨多級的病毒載體工具有HSV和VSV。
圖1. 神經元順向跨多級標記示意圖
病毒策略
- HSV-1-129
將rH129-EGFP注射到小鼠腹側被蓋區（VTA），觀察到rH129-EGFP順行跨多級到海馬（Hippocampus）、中縫背核（DR）、杏仁核背內側核前段（BMA）、腳內核（EP）、下丘腦（Hypothalamus）和鼻外皮層（Ect）。
圖2.?利用rH129-EGFP標記小鼠腹側被蓋區（VTA）的輸出神經環路（BrainVTA）
案列展示
實例一：R-NG的順向跨多級病毒示蹤
實驗動物：VGlut2-ires-Cre (Slc17a6tm2(cre)Lowl/J)?mice
使用的病毒：H129DTK-TT
實驗方法和結果：將H129DTK-TT注射到VGlut2-ires-Cre鼠的右側結神經節（R-NG），追蹤到病毒順向跨多級到AP、DMV、AP、PVH、PBNdl、SNc及VTA。
圖3. 迷走神經中樞通路的標記（Han W, et al., Cell, 2018）
- VSV
如將VSV-EGFP注射到C57小鼠Spleen區域，在大腦中樞ARC、DMH、PIRI區域檢測到熒光信號，表明VSV-EGFP順行跨多級到了這三個核團。
圖4.?將VSV-EGFP注射到小鼠Spleen區域的輸出神經環路（BrainVTA）
案列展示
實例一：OB的順向跨多級病毒示蹤
實驗動物：C57BL/6 mice
使用的病毒：VSV-mCherry
實驗方法和結果：VSV-mCherry注射到小鼠嗅球（OB）后，追蹤結果顯示，VSV感染72小時后，嗅相關腦區PIRI、LEnt和LC觀察到信號；VSV感染96小時后，更多的腦區如AON、PIRI、LEnt、HMSc、LDT及LC都觀察到信號。
圖5. 嗅球(OB)對基底前腦（BF）的輸入網絡（Zheng Y, et al., Front Neural Circuitsl, 2018）
可用于研究的神經科學問題：
- 研究大腦特定區域的全腦范圍多級輸入網絡結構；
從高級腦區向特定低級腦區反饋信息輸入的網絡結構
- 大腦內不同功能亞區之間結構連接的檢測及驗證；
- 追蹤外周器官與中樞神經系統間的聯系通路；
- 神經發育過程中的神經網絡變化；
- 疾病模型的神經網絡變異。
產品列表
| 產品編號 | 產品名稱 | 攜帶熒光蛋白 | 功能 |
| H01001 | rH129-EGFP | EGFP | 順行跨多級，綠色標記 |
| H01002 | rH129-tdTomato | tdTomato | 順行跨多級，紅色標記 |
| V01001 | VSV-EGFP | EGFP | 順行跨多級，綠色標記 |
| V01002 | VSV-mCherry | mCherry | 順行跨多級，紅色標記 |
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參考文獻