服務內容:
1.培養大量狀態良好的細胞用于后續實驗。
2.負責將客戶所購買的細胞凍存保種與本實驗室,實驗完成后客戶可以要求回寄細胞。
客戶要求及實驗周期
1.客戶購買細胞郵寄與我們培養
客戶必須提供狀態良好的細胞我們才能夠順利快速地進行實驗。因為在郵寄過程中細胞受溫度與營養缺失等因素影響很大,收到細胞時很可能細胞已經全部死亡或已經污染,這樣需要客戶再次郵寄細胞,郵寄細胞在三次以內。
2.我們也可以為客戶代為購買細胞并且提供凍存保種服務,客戶需要隨時郵寄。
3.如要培養的為具有確定目的基因的細胞株,需要提供其中相關目的基因的信息。收到細胞后我們也會及時檢測目的基因表達情況,如果沒有目的基因表達客戶需要重新提供細胞,出現此情況實驗推后我們不負相關責任。
4.客戶郵寄細胞時需一并提供細胞培養條件及相關注意事項。
5.培養周期在3-7天(視細胞類型及生長情況而定)。
MTT實驗技術服務
MTT方法簡介:
四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT方法),是通過快速簡便的顏色反應來檢測細胞存活數量。其原理是MTT可作為哺乳類動物細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當有活細胞存在時,線粒體內琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成藍紫色的針狀甲瓚(Formazan)結晶并沉積在細胞中,結晶物能被二甲基亞砜(DMSO)溶解,用酶聯免疫檢測儀在570nm波長處測定其吸光度OD值,OD值的高低可間接反映活細胞的數量及其活性。
目前MTT法常用于以下幾個方面的研究:
1、檢測細胞活性:常作為細胞毒性試驗的一種方法。
2、體外藥物敏感實驗:該方法簡便、經濟、快速,重復性好,所需的細胞數較少,沒有放射性,目前廣泛的用于臨床前的抗癌藥物的篩選研究。
3、一些細胞因子活性的研究
基本實驗步驟:
(1)將對數生長期細胞用胰酶消化后配制成濃度為1-10×104個/mL的細胞懸液,按1000-10000個細胞/孔接種于96孔板,每孔加100 μL。
(2)將平板置37℃ 、5%CO2濕度培養箱中24小時后,加入含有不同濃度受試樣本的培養液100 μL,每個樣本不同濃度設平行的三個孔,對照組加不含樣本的培養液100 μL,再放入培養箱中孵育24-72小時。
(3)用快速翻板法倒掉培養液,每孔加入用無血清1640按5 mg/mL新鮮配制的MTT溶液100 μL,溫育4小時,使MTT還原為甲瓚,再次倒掉上清液,每孔加DMSO(二甲基亞砜)200 μL,用平板搖床搖勻后,使用酶標儀測定光密度值(OD)(檢測波長570nm),以溶劑對照處理細胞為對照組,按下述公式計算化合物對細胞的抑制率,并按中效方程計算半數抑制濃度IC50。
客戶方需提供:
樣本描述,相關的實驗設計內容如細胞類型,作用時間和樣本濃度等。
1.培養大量狀態良好的細胞用于后續實驗。
2.負責將客戶所購買的細胞凍存保種與本實驗室,實驗完成后客戶可以要求回寄細胞。
客戶要求及實驗周期
1.客戶購買細胞郵寄與我們培養
客戶必須提供狀態良好的細胞我們才能夠順利快速地進行實驗。因為在郵寄過程中細胞受溫度與營養缺失等因素影響很大,收到細胞時很可能細胞已經全部死亡或已經污染,這樣需要客戶再次郵寄細胞,郵寄細胞在三次以內。
2.我們也可以為客戶代為購買細胞并且提供凍存保種服務,客戶需要隨時郵寄。
3.如要培養的為具有確定目的基因的細胞株,需要提供其中相關目的基因的信息。收到細胞后我們也會及時檢測目的基因表達情況,如果沒有目的基因表達客戶需要重新提供細胞,出現此情況實驗推后我們不負相關責任。
4.客戶郵寄細胞時需一并提供細胞培養條件及相關注意事項。
5.培養周期在3-7天(視細胞類型及生長情況而定)。
MTT實驗技術服務
MTT方法簡介:
四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT方法),是通過快速簡便的顏色反應來檢測細胞存活數量。其原理是MTT可作為哺乳類動物細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當有活細胞存在時,線粒體內琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成藍紫色的針狀甲瓚(Formazan)結晶并沉積在細胞中,結晶物能被二甲基亞砜(DMSO)溶解,用酶聯免疫檢測儀在570nm波長處測定其吸光度OD值,OD值的高低可間接反映活細胞的數量及其活性。
目前MTT法常用于以下幾個方面的研究:
1、檢測細胞活性:常作為細胞毒性試驗的一種方法。
2、體外藥物敏感實驗:該方法簡便、經濟、快速,重復性好,所需的細胞數較少,沒有放射性,目前廣泛的用于臨床前的抗癌藥物的篩選研究。
3、一些細胞因子活性的研究
基本實驗步驟:
(1)將對數生長期細胞用胰酶消化后配制成濃度為1-10×104個/mL的細胞懸液,按1000-10000個細胞/孔接種于96孔板,每孔加100 μL。
(2)將平板置
(3)用快速翻板法倒掉培養液,每孔加入用無血清1640按5 mg/mL新鮮配制的MTT溶液100 μL,溫育4小時,使MTT還原為甲瓚,再次倒掉上清液,每孔加DMSO(二甲基亞砜)200 μL,用平板搖床搖勻后,使用酶標儀測定光密度值(OD)(檢測波長570nm),以溶劑對照處理細胞為對照組,按下述公式計算化合物對細胞的抑制率,并按中效方程計算半數抑制濃度IC50。
客戶方需提供:
樣本描述,相關的實驗設計內容如細胞類型,作用時間和樣本濃度等。
