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Frdbio HRP快速標(biāo)記試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：ARL0010K                                       

主要組分：          

辣根過(guò)氧化酶(HRP ，Activated) (10mg/mL)              0.5mg/1mg/5mg

標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)                          5.0mL/15mL/30mL*2

標(biāo)記終止液干粉(Stop Buffer Powder)                   2.5mg/2.5mg*2/2.5mg*5

標(biāo)記物保存液(Labeled Product Buffer)                 2.0mL/2mL*2/10mL

適用范圍：

本試劑盒適用于帶有游離氨基的物質(zhì)的標(biāo)記，比如：帶有游離氨基（伯胺）的小分子化合物，蛋白或者抗體。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒原理：采用改良的碘氧化法活化辣根過(guò)氧化物酶（HRP），經(jīng)過(guò)氧化以后活化的HRP可以與待標(biāo)記物的游離氨基結(jié)合，發(fā)生希夫堿反應(yīng)（Schiff's base reaction）。本試劑盒適用于帶有游離氨基的物質(zhì)的標(biāo)記，比如：帶有游離氨基（伯胺）的小分子化合物，蛋白或者抗體。

儲(chǔ)存條件：

該試劑盒在低溫下運(yùn)輸，收到后請(qǐng)置于2-8℃保存，保存時(shí)間6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：

此時(shí)準(zhǔn)備待標(biāo)記物：待標(biāo)記物以0.01M pH7.4 PBS環(huán)境為佳，不應(yīng)含有甘油、疊氮鈉、氨基物質(zhì)（包括甘氨酸、Tris 等），EDTA等物質(zhì)。如果含有以上物質(zhì)，需用0.01M pH7.4 PBS 緩沖溶液進(jìn)行充分透析或者超濾管超濾以除去以上物質(zhì)保證標(biāo)記效率；調(diào)整待標(biāo)記物的濃度至適當(dāng)?shù)臐舛龋贵w調(diào)整的濃度為2mg/mL左右；對(duì)于小分子物質(zhì)需要實(shí)驗(yàn)者摸索濃度，保證HRP的比例過(guò)量，如果不能確保HRP過(guò)量的話，標(biāo)記完之后最好透析或者過(guò)濾除去未標(biāo)記的小分子物質(zhì)。

產(chǎn)品使用方法：

1.  標(biāo)記前準(zhǔn)備：

從4℃取出HRP標(biāo)記試劑盒，室溫條件下平衡30分鐘，使各組分充分解凍后混勻。

2.標(biāo)記反應(yīng)：

向待標(biāo)物的溶液中加入1/10體積的標(biāo)記緩沖液，用移液槍反復(fù)吹打幾次以充分混勻，避免產(chǎn)生氣泡；取適量辣根過(guò)氧化酶到待標(biāo)記物中，用移液槍反復(fù)吹打幾次以充分混勻，避免產(chǎn)生氣泡，室溫避光反應(yīng)2小時(shí)左右。

注：抗體:HRP標(biāo)記質(zhì)量比為 1：1；蛋白:HRP質(zhì)量比為1：4左右

3.標(biāo)記反應(yīng)終止：

將反應(yīng)終止液干粉管中加入1mL去離子水配成反應(yīng)終止液[2.5mg/ml]，取適量的反應(yīng)終止液加入步驟2的反應(yīng)液中，比例為：每10μL反應(yīng)液加入1μL反應(yīng)終止液。充分混勻，室溫放置1 小時(shí)。

4.標(biāo)記物產(chǎn)物收集與保存：

終止完成后，加入等體積的標(biāo)記物保存液，充分混勻，置于-20℃保存。

附表：抗體標(biāo)記用量參考表（本表僅做參考）

聲明：本表只做參考，具體還是需要實(shí)驗(yàn)人員根據(jù)實(shí)際情況摸索條件。

*本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用