蛋白原核表達:大腸桿菌表達純化服務
產品名稱: 蛋白原核表達:大腸桿菌表達純化服務
英文名稱: 蛋白原核表達:大腸桿菌表達純化服務
產品編號: Zonce san
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更新時間: 2025-09-01T13:36:51
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大腸桿菌表達是指通過基因克隆技術,將外源目的基因導入表達菌株,使其在特定條件下進行表達。與其他表達系統相比,大腸桿菌表達系統具有遺傳背景清楚、目的基因表達水平高、培養周期短、抗污染能力強、更易于生長和控制,有各種各樣的大腸桿菌菌株及與之匹配的具有各種特性的質粒可供選擇等優點。
E.coli的乳糖操縱子(元)含Z、Y及A三個結構基因,分別編碼半乳糖苷酶、滲透酶和乙?;D移酶,此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白,后者與O序列結合,使操縱子(元)受阻遏而處于關閉狀態。在啟動序列P上游還有一個分解(代謝)物基因激活蛋白(CAP)結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區,三個酶的編碼基因即由同一調控區調節,實現基因產物的協調表達。
在沒有乳糖存在時,lac操縱子(元)處于阻遏狀態。此時,I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合,阻礙RNA聚合酶與P序列結合,抑制轉錄啟動。當有乳糖存在時,lac操縱子(元)即可被誘導。在這個操縱子(元)體系中,真正的誘導劑并非乳糖本身。乳糖進入細胞,經β-半乳糖苷酶催化,轉變為異乳糖。后者作為一種誘導劑分子結合阻遏蛋白,使蛋白構象變化,導致阻遏蛋白與O序列解離、發生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的作用與異乳糖相同,是一種作用很強的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。
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