小鼠骨髓間充質干細胞分離液
產品名稱: 小鼠骨髓間充質干細胞分離液
英文名稱:
產品編號: LGS1081
產品價格: 0
產品產地: 天津
品牌商標: TBD
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1. 適用于各種動物血液 適用于各種動物血液 于各種動物血液及骨髓本系列產品檢索:::: A. 本分離液是敏光型的,在運輸和貯藏過程中應在 18℃-25℃避光保存,啟封后置 4 ℃保存避免微生物污染。另外,本品為真空包裝,未啟封前置于 10℃ 以下易出現白色結晶, 影響分離效果。 B. 待分離的樣本要求新鮮,避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在 20℃水浴 箱中復溫 20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在 20℃±2℃時分離效果最好,且所有操作 過程一定要在無菌條件下進行。 C. 由于各品牌離心機的性能不同,國內南北地區溫度環境和四季的差異,可能影響 分離效果,用戶可以調節離心轉數,調節離心的時間,摸索最佳的分離條件(具體分離條件 各實驗室自定)。 D. 最好使用無靜電反應的離心管,推薦使用未經過堿處理的玻璃離心管。 E. 最優抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。應注意在血液稀釋過程中應去除抗凝劑 體積。 F. 分離過程中所用其他試劑如:羥乙已基淀粉 550、全血及組織稀釋液、細胞洗滌液及 紅細胞裂解液等以我公司產品為最優選擇,本公司相關系列產品無菌、無病毒、無支原體、 低內毒素水平且無細胞毒性,所獲得的細胞可保持完好的生物活性和完整的細胞形態。 4. .. 應 4. 用 適用于從動物血液或骨髓中分離干細胞。 5.. . . 產品性能指標 pH 7.0-7.5 滲透壓 280-340mOsmol/kg 內毒素 ≤0.5...EU/ml 無菌 直接接種培養 14 天后培養基澄清 澄明度及不溶性顆粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下 6.. . . 貯藏及保存期限 貯藏及保存期限 18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置 4℃保存,有效期一周。 注::::若保證無微生物污染,啟封后可置 4℃長期保存。但應注意保存溫度較低時本分離液易出現白色結晶,影響分離效果。 7. .. 實驗前準備 7. 實驗前準備 A. 試劑 干細胞分離液、全血及組織稀釋液、細胞洗滌液、羥乙已基淀粉 550、胎牛血清 B. 器材 玻璃離心管、玻璃滴管 水平轉子離心機、無菌工作臺 8.. . . 使用方法說明及圖例 使用方法說明 A. Ⅰ. 取新鮮抗凝血液或臍帶血與羥乙已基淀粉 550(Cat#aaa::::HES----TBD550)按 1:1 比例混合, 37℃反應 5-10 分鐘(5ml 以下樣本反應 5 分鐘,5ml 以上樣本反應 10 分鐘); Ⅱ. 取新鮮抗凝骨髓,加入一份細胞洗滌液(Cat#:2010X1118),混勻后以 400g(約 1500 轉/分)離心 5 分鐘,棄去上清。沉淀與羥乙已基淀粉 550(Cat#aaa::::HES----TBD550) 按 1:1 比例混合,37℃反應 5-10 分鐘(5ml 以下樣本反應 5 分鐘,5ml 以上樣本反 應 10 分鐘); B. 加入為步驟 A 中所得混合液 1/2 體積的全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)混勻 20 ℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘,吸取上清備用; C. 向步驟 B 中所得上清液中加入為其一倍以上體積的細胞洗滌液(Cat#:2010X1118)混 勻,以 500g(約 1800 轉/分)離心 15 分鐘(半徑 15cm 水平轉子),棄去上清保留沉淀 細胞; D. 向細胞沉淀中加入全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)調整細胞濃度為 2×1081× 109個/ml,小心疊加于細胞分離液之液面上(混合液:分離液=2:1); E. 以 400g(約 1500 轉/分)離心 20 分鐘(半徑 15cm 水平轉子); 此時,離心管中由上至下分為四層:第一層;為稀釋液層。第二層;為環狀乳白色含所 需干細胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為極少數紅細胞層。收集第二層細胞放入 約為其 5-10 倍體積的細胞洗滌液(Cat#:2010X1118)中,充分混勻后以 500g(約 1800 轉 /分)離心 15 分鐘。沉淀經反復洗滌 2 次既得所需干細胞。 F. 為獲得純度更高的干細胞,在步驟 E 中離心完成后可吸取第二層干細胞層再與羥乙已基淀粉 550(Cat#aaa::::HES----TBD550)按 1:1 比例混勻,20℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘,收集上清。只能用于科學研究,不能用于臨床檢測 血小板 100-300×109/L(10 萬-30 萬個/mm3) 名稱 占白細胞總數百分比 嗜中性粒細胞 30%-70% 嗜酸性粒細胞 0.5%-5% 嗜堿性粒細胞 0%-1% 淋巴細胞 20%-40% 白細胞分類計數 單核細胞 3%-8% 干細胞 約占外周血細胞數量3%
