胰蛋白酶－EDTA 消化液(0.25%)

貨號 規格 備注
T1300 100ml 不含酚紅
T1320 100ml 含酚紅
產品說明：
在組織細胞的體外培養和原代細胞培養中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）以及傳代細胞培養中，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA 等，其功能主要是使細胞間的蛋白質（如細胞外基質）水解，使組織或貼壁細胞分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗。
索萊寶生產的胰蛋白酶-EDTA 消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA（0.53mM），溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經過濾除菌，可以直接用于培養細胞和組織的消化。本產品具有方便快速、穩定安全、細胞狀態好等特點。通常室溫消化 2 分鐘左右就可以消化下大多數貼壁細胞。胰蛋白酶-EDTA 消化液有含酚紅和不含酚紅 2 類產品，酚紅具有 pH 指示作用。
保存：-20℃保存，有效期 12 個月。
使??法：
1. 貼壁細胞的消化：
a) 吸去培養液，用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液，蓋過細胞即可，室溫放置 1-2 分鐘。不同的細胞消化時間有所不同，對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。
c) 顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
d) 如果發現消化不足，可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化。
e) 如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2. 組織的消化：
不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項：
?1．由于組織或細胞性質不同，實驗人員應依據具體情況，確定最佳消化時間；消化細胞時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁和生長狀況；
?2．本產品不含抑菌劑，在使用過程中要特別注意無菌操作，避免消化液被微生物污染；
?3．不宜 4℃長期保存，切忌反復凍融，小量使用時建議分裝凍存；
?4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
相關文獻：
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699