單核苷酸多態性分析（SNP）檢測服務
產品名稱： 單核苷酸多態性分析（SNP）檢測服務
英文名稱： SNP
產品編號： 005
產品價格： 詢價
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更新時間： null
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上海迪奧生物科技有限公司
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| 基因單核苷酸多態性（SNP）突變檢測服務? |
| 一、 定義:? |
| ?????? 1)一種遺傳標記，包括單個堿基的缺失和插入，更多情況是單個堿基的置換。 |
| ?????? 2)通常情況下是一種二等位基因的變異，多為轉換，即一種嘧啶堿基換為另一種嘧啶堿基，或一種 嘌呤堿基換為另一種嘌呤堿基，轉換與顛換之比為2：1。? |
| ?????? 3)SNP在CG序列上出現最為頻繁，而且多是C→T，因為CG中C即胞嘧啶常為甲基化的，自發脫氨 后即變為胸腺嘧啶。? |
| ?????? 4)人類基因組SNP位點的數量：目前的估計不完全相同，有人估計每400bp就有一個堿基不同；另一些人則估計變異頻率在0.5‰--10‰。如果假定1/1000的堿基是多態，那么人類30億堿基中就 有300萬SNP位點。? |
| ?????? 5)SNP的分布不均勻，非轉錄序列中要多于轉錄序列，絕大多數位于蛋白的非編碼區。? |
| ?????? 6)重要性：雖然SNP 不及RFLP（Restriction Fragment Length Polymorphism）和短串聯重復序列 STR標記變異程度高，但由于數量巨大，分布頻密，因此就整體而言，其多態性要高得多。? |
| ?????? 7)檢測方便：大多為二態，便于自動化批量檢測。? |
| 二、 方法 DNA序列分析（DNA sequencing） 應用各種突變檢測技術檢測到的基因突變，最后都需用序列分析才能確定突變類型及突變位置，其效率可以達到100％ |
| 主要有兩種方法： |
| ????? ?1,測序法：現在的測序方法已與經典的方法有了很大的不同，其基本原理雖仍是雙脫氧終止法，但自動化程度大為提高，操作更簡便，測序時間也大大縮短。隨著PCR技術與測序聯合使用，不需經過M13亞克隆步驟，故稱為直接測序法（direct sequencing,DS）。 |
| ????? ?2,探針法：實驗原理：探針只與模板特異性地結合，其結合位點在兩條引物之間。探針的5′端標記有報告基團(Reporter, R)，如FAM、VIC等，3′端標記有熒光淬滅基團(Quencher, Q)，如TAMRA等。當探針完整的時候，報告基團所發射的熒光能量被淬滅基團吸收，儀器檢測不到信號。隨著PCR的進行，Taq酶在鏈延伸過程中遇到與模板結合的探針，其5′→3′外切核酸酶活性就會將探針切斷，報告基團遠離淬滅基團，其能量不能被吸收，即產生熒光信號。在探針的5’端使用不同的Report熒光基團，單一PCR中可以檢測到多個探針的雜交與相應熒光。只有與模板完全匹配的TaqMan探針在與等位基因發生特異性雜交后，利用Taq酶的5’外切酶活性作用使得探針的5’Report熒光能夠被檢測。? |
| 實驗步驟如下：? |
| (1)客戶收集標本(血液或組織等標本);? |
| (2)確定基因突變SNP位點, 設計合成特異PCR擴增普通引物及探針,并在NCBI網站做BLAST;? |
| (3)進行PCR擴增,通過SNP分型獲得實驗報告;? |
| (4)分析報告,給出實驗結果;? |
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本公司提供探針法SNP技術服務 1)snp原理圖
2）SNP散點圖
3）純合子擴增曲線
4）雜合子擴增曲線
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