Frdbio®AutoExp原核表達培養基
產品名稱: Frdbio®AutoExp原核表達培養基
英文名稱:
產品編號: PER0020
產品價格: 0
產品產地: 中國
品牌商標: Frdbio
更新時間: 2023-08-15T17:03:56
使用范圍: null
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- 所在區域 : 湖北省
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1.包裝清單:
產品編號 | 名稱 | 規格 | 特性 |
PER0020 | AutoExp原核培養基 | 20 ml/50ml/500 ml | 無需IPTG誘導,蛋白即可自動大量表達 |
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2.保存條件:本品置于-20℃保存,有效期1年。冷凍保存后出現微量沉淀為正常現象,不影響效果。
3.產品簡介:
FrdbioRAutoExp是Frdbio公司推出的新型蛋白誘導表達培養基組分。大腸桿菌表達菌株在含AutoExp的培養基中生長到對數后期能夠開始自行大量表達目的蛋白。與傳統的IPTG誘導相比,使用AutoExp進行蛋白誘導具有以下優勢:1)表達量高,是傳統IPTG法誘導量的數倍;2)操作簡單,省卻了對菌體濃度、IPTG用量及誘導時間的優化;3)重復性好,不同批次的蛋白誘導情況穩定。
4.適用范圍
能用IPTG誘導蛋白表達的大腸桿菌菌株。
5.使用方法
l??將表達質粒轉化表達宿主,挑取轉化子于含有相應抗生素的2 ml 含0.8% LB液體培養基中活化培養?;罨囵B基中添加葡萄糖可防止蛋白滲漏表達并造成細胞毒性。
l??在每個含50 ml LB培養基的三角瓶中(容積為250 ml)加入2 ml AutoExp,并添加合適濃度的抗生素。
l??向三角瓶中接種0.2 ml新鮮活化的菌液。
l??將三角瓶用干燥濾紙片封口,置于37 ℃恒溫搖床培養,轉速設為200 rpm。
l??培養菌體至飽和(約12-15小時)后收集細胞,隨即進行細胞破碎和蛋白純化。
6.注意事項
l??不要在培養基中添加額外成分,也不要改變菌體生長溫度、縮短菌體生長時間,否則目的蛋白可能無法被正常誘導。
l??為達到最大的蛋白誘導量,培養過程中應使培養液具有足夠的通氣量,因此三角瓶中培養基的量不可過多,瓶口應用通氣性良好的濾紙封閉,且培養時搖床的轉速不可過低。
l??許多情況下50 ml經AutoExp誘導的菌液可表達高至5~20 mg的目的蛋白。但對于少數毒性蛋白,AutoExp的誘導量會較低。
l??平均而言,AutoExp誘導與IPTG誘導得到的蛋白在可溶性方面相當。
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7.附注
l??LB培養基配制方法:稱取10 g tryptone,5 g yeast extract,5 g NaCl,加水溶解,定容至1 L,然后按每瓶50 ml分裝至容積為250 ml的三角瓶中,置于121℃滅菌30 min。
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*本試劑僅供實驗室研究使用
