Caki-2人腎透明細胞癌細胞
產(chǎn)品名稱： Caki-2人腎透明細胞癌細胞
英文名稱： Caki-2
產(chǎn)品編號： HUCL-005
產(chǎn)品價格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 上海
品牌商標： iCell
更新時間： null
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 饒志強
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貨號：HUCL-005
細胞介紹
該細胞源自一位69歲白人男性的初期腎腺癌組織。
細胞特性
1）?來源：腎
2）?形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長
3）?含量：>1x106?個/mL
4）?污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）?規(guī)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
細胞用途：僅供科研使用。
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細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）?準備McCoys?5a?Medium培養(yǎng)基(McCoys?5a?Medium:SIGMA,貨號M4892,?添加NaHCO3?2.2g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）?培養(yǎng)條件：?氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。?溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）?凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．?細胞處理：
1）?復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）?細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.?棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.?加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM?EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.?按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.?將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項：?
1.?收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2.?所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
賽百慷（上海）生物技術(shù)股份有限公司
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