慢病毒，腺病毒，RNAi/基因過表達服務

慢病毒包裝

威斯騰生物（Western Biotechnology）專業實驗平臺是目前較為先進，實驗技術齊全的平臺和國內外多家知名研究院所合作，為國內6000多家客戶提供專業技術服務。威斯騰生物平臺的慢病毒技術是國內做得最早，質量最穩定的產品，專業技術團隊，標準化生產流程，嚴格的質量把控，本平臺為您提供慢病毒載體構建，慢病毒包裝以及基于慢病毒技術的穩定細胞系構建，后續功能驗證的體外和體內實驗等相關服務。

慢病毒（Lentivirus）具有感染譜廣泛，可以有效感染分裂期和靜止期細胞，長期穩定表達外源基因等優點，因此成為導入外源基因的有力工具。現在慢病毒系統已經被廣泛應用到各種細胞系的基因過表達，RNA干擾，microRNA研究以及活體動物實驗中。

慢病毒載體系統為4質粒系統，包括pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G和目的穿梭質粒。其中穿梭質粒（目的穿梭質粒）含有eGFP（能表達綠色熒光蛋白），pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G含有病毒包裝所必須的元件。

慢病毒載體的優越性:

基于HIV的慢病毒載體（Lentiviral Vector）能有效地感染分裂細胞和非分裂細胞，比傳統的逆轉錄病毒載體應用范圍廣。與脂質體轉染相比，慢病毒感染具有更高的效率；?能高效地將目的基因轉導入體內和體外培養的細胞中去；能夠穩定地長期地表達目的基因，優于腺腺病毒載體；由于更換了膜蛋白（VSVG），宿主范圍相當廣泛。通過合理設計極大的加強了其安全性，沒有產生復制型慢病毒的可能性，安全性考來自其整合特性。

?

【服務項目】

一、慢病毒載體構建服務

1.1? Western Biotechnology可為您構建包括eGFP、RFP、puromycin、neomycin等各種標簽的慢病毒基因過表達載體和RNA干擾載體，可以為客戶的實驗設計提

供豐富的選擇方案。

1.2 本平臺還可以根據客戶需要對載體的啟動子和表達框進行改造，實現組織特

異性或調控表達的特殊需要。

二、RNAi慢病毒系列服務

2.1 siRNA化學合成。

2.2重組慢病毒shRNA慢病毒質粒構建。

2.3定制shRNA慢病毒構建與包裝服務(已知有效靶序列)。

客戶需提供已通過文獻查詢或實驗證明的有效靶點序列信息的 shRNA的序列.我們按照客戶要求完成shRNA慢病毒產品的制備，可以提供慢病毒shRNA質粒和shRNA慢病毒產品等。

定制RNAi慢病毒產品可直接用于細胞系，原代細胞，干細胞，動物組織等的感染，表達shRNA。

* Easy shRNA慢病毒構建與包裝服務

腺病毒包裝

腺病毒(adenovirus)是一種沒有包膜的直徑為70～90 nm的顆粒，由252個殼粒呈廿面體排列構成。每個殼粒的直徑為7～9 nm。衣殼里是線狀雙鏈DNA分子，約含35 000 bp，兩端各有長約100 bp的反向重復序列。由于每條DNA鏈的5，端同相對分子質量為55X103Da的蛋白質分子共價結合，可以出現雙鏈DNA的環狀結構。人體腺病毒已知有33種，分別命名為adl～ad33，研究得最詳細是ad2。腺病毒基因組轉錄產生mRNA，已知的轉錄單位至少有5個：正Ⅰ區位于病毒基因組左側，可再分成正ⅠA和正ⅠB，與細胞轉化有關；正Ⅱ區編碼DNA結合蛋白，參與病毒的復制；正Ⅲ區編碼出現在宿主細胞表面的一種糖蛋白；正Ⅳ區位于ad2基因組右端，受正Ⅱ區編碼的DNA結合蛋白質調控；第5個轉錄單位在病毒感染中期合成ad2蛋白質Ⅳ。?
腺病毒特性：
威斯騰生物腺病毒表達系統是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA為骨架，在克隆、包裝、擴增等各部分條件做了改進和優化，達到了克隆陽性率更高、質量更可靠、包裝穩定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基礎上，提供各種帶有不同報告基因、不同標簽的重組腺病毒載體服務。同時我們還可以根據客戶需要完成各種較高難度的載體構建，如雙基因載體構建，具有細胞毒性作用基因的腺病毒載體構建等。所得到的毒液可以用于信號轉導、基因轉位、Co-IP、動物實驗、干細胞研究等科研實驗。
我們的服務：
（1）表達目的基因的重組腺病毒載體構建服務（最大插入片段5kb）
（2）超大量及超高滴度的重組腺病毒擴增和純化服務
（3）重組腺病毒載體的鑒定
（4）shRNA基因沉默效應驗證
（5）表達shRNA的重組腺病毒載體的構建服務
（6）構建各種帶不同標簽和不同報告基因的腺病毒載體
（7）可調控表達的重組腺病毒載體
（8）目的基因的克隆，或者定購
（9）質量控制
服務承諾
（1）我們承諾從得到cDNA到完成純化的服務時間將在70個工作日內完成
（2）我們承諾所提供的病毒毒液的滴度在1011PFU/ml以上（純化后），總量不少于1012 PFU/ml
（3）?所提供的毒液量：2～3ml
（4）?可以包裝任何有細胞毒性作用的基因；保證100%的包裝成功率

威斯騰實驗服務流程

威斯騰生物服務項目