產品描述

膠原酶（Collagenase）是一種蛋白酶，一種肽鏈內切酶，能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現在膠原中，很少發現于其他蛋白中）并切割該序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽，但膠原酶是唯一一種可以降解具有三股超螺旋結構的天然膠原纖維的蛋白酶，這種膠原纖維廣泛存在結締組織內。

本品來源于溶組織梭菌（Clostridium histolyticum），是一種酶粗提物，不僅含有膠原酶（更準確的稱法為梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能夠降解天然膠原和網狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分別能夠有效水解

結締組織和上皮組織細胞外基質內的其他蛋白，多糖和脂質，使得本品非常適用于組織消化。

目前商業化提供的細菌膠原酶主要根據膠原酶活性的差異，分為四種類型：膠原酶I型、II型、III型和IV型，在應用上有所偏向：1）膠原酶I（Type I Collagenase）：含有比較均勻的各種酶活力（包括膠原酶，酪蛋白酶，梭菌蛋白酶，胰蛋白酶活性）。通常用作上皮細胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細胞的制備；2）膠原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來源細胞的制備；3）膠原酶III（Type III Collagenase）：含有較低的蛋白酶活性，常用于乳腺細胞的制備；4）膠原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰島細胞的制備，或者需要維持受體完整性的細胞制備實驗。

本品為II型膠原酶，≥125 U/mg solid，可用于心、甲狀腺、唾液腺、肝、骨、軟骨等組織和細胞的解離。

酶活力單位定義

在37℃，pH7.5 的條件下，5 h內水解膠原產生相當于1 µM L-亮氨酸的酶量定義為1個酶活力單位。

運輸和保存方法

室溫運輸。4℃避光保存，2年有效。儲存液-20℃避光凍存。

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）本產品僅作科研用途！

使用方法

1. 膠原酶儲存液的配制

向每管100 mg的膠原酶中加入1 mL的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS（Hank’s平衡鹽溶液，含Ca²⁺、Mg²⁺），輕輕旋渦震蕩使其充分溶解，制備成100 mg/mL（即100×）的儲存液。然后用低蛋白結合性的0.22 μm的濾膜過濾除菌，分裝成小份量，然后于-20℃避光凍存。

使用前于冰上解凍，避免反復凍融。其用于組織和細胞分散的常用濃度為：0.5-2.5 mg/mL，用于軟骨消化的常用濃度為1-2 mg/mL，需要根據特定的實驗條件或者參考相應的文獻資料確定所需的最佳工作濃度。

2．組織的分離

1）使用無菌手術刀或剪刀將組織切成3-4 mm大小的組織塊；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗滌組織塊數次；